[发明专利]一种微生物发酵生产单细胞蛋白的方法

权利要求书

1.一种微生物发酵生产单细胞蛋白的方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、向装有驯化培养基的反应器中通入混合气，得到驯化体系，用于对接种物进行培养和驯化；

S2、向装有发酵培养基的反应器中通入混合气，得到混合发酵体系，用于对驯化微生物进行发酵培养；

S3、将厌氧微生物和好氧微生物接种到驯化体系中，进行培养和驯化，得到驯化微生物；

S4、将驯化微生物接种到混合发酵体系中，进行发酵培养；

S5、将发酵产物进行处理，得到单细胞蛋白。

2.根据权利要求1所述的微生物发酵生产单细胞蛋白的方法，其特征在于：步骤S1中，所述驯化培养基的制备包括以下步骤：

S1-1、配置基础培养基

所述基础培养基的配方为每升溶液中含有以下量的物质：磷酸二氢钾2.3g、磷酸氢二钠2.9g、氯化铵1g、硫酸镁0.5g、碳酸钠0.5g、氯化钙0.01g、柠檬酸铁铵0.05g、硼酸0.6mg、氯化钴0.4mg、硫酸锌0.2mg、氯化锰0.06mg、钼酸钠0.06mg、氯化镍0.04mg、硫酸铜0.02mg；

S1-2、将基础培养基在120-125℃下灭菌15-30min，冷却至室温后加入15g/L琼脂，得到驯化培养基。

3.根据权利要求1所述的微生物发酵生产单细胞蛋白的方法，其特征在于：步骤S1中，混合气中H₂和O₂组分可变，所述混合气的体积组成为H₂：O₂：CO₂＝50:35:15～70:15:15。

4.根据权利要求1所述的微生物发酵生产单细胞蛋白的方法，其特征在于：步骤S2中，所述发酵培养基的制备包括以下步骤：

S2-1、配置基础培养基

所述基础培养基的配方为每升溶液中含有以下量的物质：磷酸二氢钾2.3g、磷酸氢二钠2.9g、氯化铵1g、硫酸镁0.5g、碳酸钠0.5g、氯化钙0.01g、柠檬酸铁铵0.05g、硼酸0.6mg、氯化钴0.4mg、硫酸锌0.2mg、氯化锰0.06mg、钼酸钠0.06mg、氯化镍0.04mg、硫酸铜0.02mg；

S2-2、将基础培养基在120-125℃下灭菌15-30min，冷却至室温后添加外源有机碳源和氮源，混合均匀，得到发酵培养基。

5.根据权利要求4所述的微生物发酵生产单细胞蛋白的方法，其特征在于：步骤S2-2中，所述外源有机碳源为葡萄糖，葡萄糖添加量为1-100g/L；

优选地，步骤S2-2中，所述氮源为NH₄Cl，添加NH₄Cl将培养基的初始氮含量控制在100-10000mg/L。

6.根据权利要求1所述的微生物发酵生产单细胞蛋白的方法，其特征在于：步骤S2中，混合气中H₂和O₂组分可变，所述混合气的体积组成为H₂：O₂：CO₂＝50:35:15～70:15:15。

7.根据权利要求1所述的微生物发酵生产单细胞蛋白的方法，其特征在于：步骤S3中，所述培养和驯化在摇床反应器中进行，反应条件为温度25-35℃，pH＝6.0-8.0，摇床反应器的振荡速率为150±50rpm；

优选地，所述摇床反应器中液相基质与摇床反应器顶空的体积比为200:415～300:315；

优选地，步骤S3中，接种物(厌氧微生物和好氧微生物)与驯化培养基用量的体积比为50:250～50:150；

优选地，步骤S3中，每12-24小时向驯化体系内补充混合气至0.1-5atm；

优选地，步骤S3中，所述厌氧微生物和好氧微生物接种量的体积比为25:25；

优选地，步骤S3中，驯化完成的判断条件如下：驯化体系中的混合气日消耗量60％。