[发明专利]一种疏水改性蛋白质生物破乳剂

权利要求书

1.一种疏水改性蛋白质生物破乳剂，其特征在于将生物破乳剂用磁纳米材料改性，所述的生物破乳剂为芽孢杆菌XH-1所产生的蛋白质分泌物，所述芽孢杆菌XH-1保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏编号为CGMCC No.5460，保藏时间为2011年11月14日；所述的磁纳米材料为辛基改性的磁性纳米四氧化三铁。

2.根据权利要求1所述的一种疏水改性蛋白质生物破乳剂，其特征在于由4ml的破乳蛋白溶液与50mg的辛基改性的磁性纳米四氧化三铁配置而成，所述破乳蛋白溶液是将生物破乳剂溶解在pH=7的磷酸盐缓冲液（PBS）中，破乳蛋白浓度为200mg/ml；所述辛基改性的磁性纳米四氧化三铁由0.5ml硅烷化试剂辛基三甲氧基硅烷和1g磁性纳米四氧化三铁在6ml氨水作为催化剂下配制而成。

3.根据权利要求1或2所述的一种疏水改性蛋白质生物破乳剂，其特征在于生物破乳剂的制备方法是：一、取芽孢杆菌XH-1接种于液体培养基中，在温度为30±2℃、150r/min的条件下培养24h，得到种子液；二、将种子液按10%的体积比接种于发酵罐的培养液中，在温度30±2℃的条件下培养24h，得到破乳菌全发酵液；三、将破乳菌全发酵液以5000r/min的转速离心5min，然后取上清液，在温度为50℃的条件下浓缩至体积为原上清液体积的十分之一，得到浓缩液，即为生物破乳剂；其中步骤二中培养液与步骤一中液体培养基成分相同；步骤一种液体培养基由K₂HPO₄ 4.0 g，KH₂PO₄ 6.0 g，NH₄Cl 4.0 g，MgSO₄·H₂O 0.2 g，微量元素溶液1 mL，酵母膏 1.0 g，液体石蜡 4%（v/v），去离子水 1000 mL组成，所述的微量元素溶液由1000mg的CaCl₂·H₂O、 1000 mg的FeSO₄.7H₂O、 1400 mg EDTA溶解于1000ml的蒸馏水制成，培养基在121℃下灭菌30min。

4.根据权利要求1或2所述的一种疏水改性蛋白质生物破乳剂，其特征在于辛基改性的磁性纳米四氧化三铁的制备：一、取 2 g Fe₃O₄ 纳米粒子，加入到含有 160ml乙醇、40 ml水、5 ml氨水的混合液中，超声处理 1 h 后，然后将 5 m L正硅酸乙酯（TEOS）缓慢加入到该溶液体系，室温、350 r/min 连续机械搅拌反应 12 h，用去离子水将沉淀洗涤数次，然后用 0.1 mol/l的盐酸处理沉淀 12 h，以去除未包裹上SiO₂ 的Fe₃O₄ 纳米粒子，将沉淀物在室温下真空干燥 24 h得磁性 Fe₃O₄-SiO₂载体；二、在 250 ml圆底烧瓶中，加入 1 g 磁性Fe₃O₄-SiO₂载体，超声处理 1 h，使载体均匀分布在 60 ml 乙醇中，然后加入 6.0 m LNH₃H₂O，继续超声 10 min，随后向反应液中缓慢加入 0.5ml辛基三甲氧基硅烷，在 50℃下持续搅拌反应 8 h，用永久性磁铁将载体和溶液分离，载体分别用乙醇和水充分洗涤至中性，最后在常温下真空干燥 24 h，获得含有辛基官能团的Fe₃O₄-SiO₂磁性复合载体。

5.一种疏水改性蛋白质生物破乳剂，应用于含油污水处理。