[发明专利]NP@Ne复合物及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了NP@Ne复合物及其制备方法和应用，所述复合物由纳米材料(NP)和中性粒细胞(Ne)组成，二者通过静电吸附、范德华力、氢键、化学反应或抗原‑抗体亲和反应结合，二者的结合部位为细胞表面、细胞内、细胞器内中的至少一种。与现有技术相比，本发明具有以下优点：(1)本发明所述复合物通过结合NP和Ne，发挥二者的协同作用，从而激活Ne的抗肿瘤功能；(2)所述复合物的制备方法简单，易于操作，成功融合了Ne和NP的功能，为进一步激发Ne的功能提供了新的思路和方法。

技术领域

本发明属于生物医药和纳米材料技术领域，涉及一种通过纳米材料调控及激活中性粒细胞的方法，从而进一步发挥中性粒细胞的功能，具体为NP@Ne复合物及其制备方法和应用。

背景技术

中性粒细胞(Ne)是维持固有免疫系统健康运转的重要成员。目前，它被证明有抗肿瘤和促肿瘤的两面性。在肿瘤患者体内，Ne会通过多种途径促进肿瘤细胞的生长，如促进肿瘤微血管生成、抑制免疫细胞活化、护送循环肿瘤细胞转移等。但Ne内含有许多抗肿瘤物质，如颗粒、过氧化氢、一氧化氮等。因此，对患者自身的Ne进行调控，使其在肿瘤部位大量释放抗肿瘤物质，是一项有潜力的肿瘤治疗方法。

发明内容

解决的技术问题：为了克服现有技术的不足，通过在Ne上装载NP，获得一种能够调控Ne释放自身抗肿瘤内容物的方法，从而发挥Ne的抗肿瘤功能；鉴于此，本发明提供了NP@Ne复合物及其制备方法和应用。

技术方案：NP@Ne复合物，所述复合物由纳米材料(NP)和中性粒细胞(Ne)组成，二者通过静电吸附、范德华力、氢键、化学反应或抗原-抗体亲和反应结合，二者的结合部位为细胞表面、细胞内、细胞器内中的至少一种；其中，复合物中的NP为调控子或激活子，Ne自身携带活性物质，NP经信号刺激后对Ne发挥调控或激活作用。

优选的，所述NP为无机材料、有机材料、聚合物或有机物与无机物混合材料。

优选的，所述NP包括金纳米材料、氧化铜纳米材料、氧化铁纳米材料、二氧化硅纳米材料、嵌段共聚物纳米材料、聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米材料、金属有机框架或以蛋白为模板形成的纳米簇。

优选的，所述NP的形状为球形、棒状、星状、核壳结构、脂质体或中空结构。

优选的，所述复合物受到信号刺激后产生物理或化学性质改变，其中信号刺激为外源性刺激或内源性刺激，其中外源性刺激为激光或超声，内源性刺激为酸性环境(pH5.5)或高谷胱甘肽表达(表达量5mmol/L)。

以上任一所述NP@Ne复合物的制备方法，所述方法包括以下步骤：

S1、制备具有造影、靶向、光热转换、光声转换或磁热功能的NP；

S2、分离Ne，将NP装载在Ne表面或内部；

S3、对S2制备的产物进行分离纯化获得NP@Ne复合物。

S1所述的NP合成方法包括以下几种：

四氧化三铁-二氧化硅的核壳纳米材料通过溶剂热法和硅酸盐沉降法合成，具体步骤如实施例1、2。使用溶剂热法合成四氧化三铁纳米粒。将乙酸钠和六水合三氯化铁混合溶解在乙二醇中，在衬有特氟龙的不锈钢高压釜中加热到200℃。10小时后，高压釜冷却至室温，用甲醇和双蒸水各洗涤3次所得产物。产物为四氧化三铁纳米粒，图1是其透射电子显微镜图，可见材料呈均匀球形。将四氧化三铁纳米粒溶解在80％甲醇(预先用氨水调至pH＞9)中，超声并搅拌30分钟后，边搅拌边滴加原硅酸四乙酯(TEOS)和吲哚菁绿(ICG)的混合甲醇溶液，之后避光搅拌12小时，使用甲醇和双蒸水各清洗三次所得产物，即得到近红外光响应的NP。图2是其透射电子显微镜图，可见材料呈均匀球形。