[发明专利]一种用于人免疫缺陷病毒全血抗体早期检测的缓冲液及其使用方法在审
申请号: | 202110037261.0 | 申请日: | 2021-01-12 |
公开(公告)号: | CN112816690A | 公开(公告)日: | 2021-05-18 |
发明(设计)人: | 石崧 | 申请(专利权)人: | 瑞吉瑞得医药生物科技(无锡)有限公司 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569;G01N33/58;G01N33/68;G01N33/53 |
代理公司: | 河北亿顺捷知识产权代理事务所(普通合伙) 13152 | 代理人: | 王晓丰 |
地址: | 214000 江苏省无锡市新吴区清源路18*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 免疫 缺陷 病毒 抗体 早期 检测 缓冲液 及其 使用方法 | ||
本发明公开了一种用于人免疫缺陷病毒全血抗体早期检测的缓冲液及其使用方法,涉及全血样本预处理技术领域,包括:所述缓冲液包括Tris盐酸盐、肝素钠、Triton X100中性表面活性剂、Benzonase核酸酶,所述缓冲液的pH值为8.0;所述Tris盐酸盐摩尔浓度为98~103mM,所述肝素钠的添加量为8~12IU,Triton X100中性表面活性剂质量百分含量为0.08~0.12%,所述Benzonase核酸酶的添加量为0.8~1.3IU。本产品通过新设计的缓冲系统和胶体金试纸,使对HIV抗体的检测敏感度得到提升,从而实现对AIDS患者更早的治疗和干预。
技术领域
本发明涉及全血样本预处理技术领域,具体为一种用于人免疫缺陷病毒全血抗体早期检测的缓冲液及其使用方法。
背景技术
胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,形成带负电的疏水胶溶液,由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合,由于这种结合是静电结合,所以不影响蛋白质的生物特性。
胶体金除了与蛋白质结合以外,还可以与许多其它生物大分子结合,如SPA、PHA、ConA等。根据胶体金的一些物理性状,如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应,加上结合物的免疫和生物学特性,因而使胶体金广泛地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。
当检测全血样本中的人免疫缺陷病毒(HIV)抗体时,由于在HIV高危暴露后往往有较长潜伏期和窗口期,此时血液中HIV抗体含量较低,不容易被检测出来。
发明内容
本发明专利的目的在于提供一种用于人免疫缺陷病毒全血抗体早期检测的缓冲液及其使用方法。
为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:一种用于人免疫缺陷病毒全血抗体早期检测的缓冲液,所述缓冲液包括Tris盐酸盐、肝素钠、Triton X100中性表面活性剂、Benzonase核酸酶,所述缓冲液的pH值为8.0;
所述Tris盐酸盐摩尔浓度为98~103mM,所述肝素钠的添加量为8~12IU,TritonX100中性表面活性剂质量百分含量为0.08~0.12%,所述Benzonase核酸酶的添加量为0.8~1.3IU。
优选的,所述Tris盐酸盐摩尔浓度为100mM,所述肝素钠的添加量为10IU,TritonX100中性表面活性剂质量百分含量为0.1%,所述Benzonase核酸酶的添加量为1IU。
一种用于人免疫缺陷病毒全血抗体早期检测的缓冲液的使用方法,包括以下步骤:
S1、指尖血取样针刺破指尖;
S2、用聚乙烯滴管吸取0.5毫升150mM NaCl洗脱约150ul指尖血,滴入血液样本收集管中;
S3、取另一支聚乙烯滴管吸取0.5毫升缓冲液滴入血液样本收集管,吹打三次以匀浆;
S4、将血液样本收集管在10-35℃的环境内静置20分钟;
S5、用第三支聚乙烯滴管从血液样本收集管中吸取已预处理的样品,滴入胶体金试纸的样品垫,每孔滴入0.3-0.5毫升,静置15-20分钟读取结果。
优选的,所述胶体金试纸具体为可被HIV的IgM和IgG识别抗原的双卡胶体金试纸条。
与现有技术相比,本发明的有益效果是:
本产品通过新设计的缓冲系统和胶体金试纸,使对HIV抗体的检测敏感度得到提升,从而实现对AIDS患者更早的治疗和干预。
具体实施方式
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