[发明专利]一株高效氯氟氰菊酯降解菌及其应用

说明书

本发明属于环境中农药污染去除以及生物修复技术领域，一株高效氯氟氰菊酯降解菌及其应用。本发明高效氯氟氰菊酯降解菌于2020年5月12日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCC No.19810，该菌株16SrDNA的GenBank登录号为MT320017，经鉴定为基内苍白杆菌，该菌来自长期受高效氯氟氰菊酯污染的土壤，经人工富集驯化培养，分离纯化得到，命名为LB1。该菌为革兰氏阴性菌，菌体呈短杆状，菌落颜色为白色，不透明，表面湿润光滑，凸起，边缘整齐，易挑取，其最适生长条件为：pH7.0～8.0，温度25～30℃。

技术领域

本发明属于环境中农药污染去除以及生物修复技术领域，具体涉及一株高效氯氟氰菊酯降解菌的筛选及其在污染土壤和水体生物修复治理中的应用。

背景技术

高效氯氟氰菊酯(Lambda-cyhalothrin)又名三氟氯氰菊酯或功夫菊酯，是在天然除虫菊酯的化学结构基础上，用三个氟和氯取代了对光不稳定的菊酸侧链的环丙烷羧酸乙烯侧链上的甲基，使其结构更稳定，毒性更强，杀虫谱更广，药效更快。因而在我国广泛用于蔬菜、棉花、茶叶和果树等作物除虫。高效氯氟氰菊酯在自然光辐射下具有很好的光稳定性，并且对植物和微粒有很强的吸附亲和力，容易在环境中大量残留。在我国高效氯氟氰菊酯的残留和超标现象较为普遍，频繁过量地使用高效氯氟氰菊酯会增加非靶标生物的环境风险，会对人类及其他生物的运动系统、生殖系统、呼吸系统和免疫系统等多个系统造成严重损害。

环境中残存的高效氯氟氰菊酯可以通过化学氧化、吸附剂吸附以及生物降解等多条途径进行去除，而微生物降解去除被认为是最经济有效的手段。我国是一个生物资源大国，微生物物种、代谢和生态类型丰富多样，自然环境中存在着大量的细菌、放线菌、真菌及藻类等微生物，为菌株的筛选提供了充足的资源。从长期高浓度农药污染土壤中筛选分离高效降解菌株，再与土著微生物群落协同作用，转化降解高效氯氟氰菊酯农药残留，是修复该农药污染土壤和水体的有效途径，因降解效率高、成本低、生态恢复良好、以及无二次污染等特点会赋予其广阔的应用前景。

发明内容

本发明的目的是提供一株高效氯氟氰菊酯降解菌及其在实际环境中的应用。

本发明高效氯氟氰菊酯降解菌于2020年5月12日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCC No.19810，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，该菌株16S rDNA的GenBank登录号为MT320017。所述高效氯氟氰菊酯降解菌经鉴定为基内苍白杆菌(Ochrobactrum intermedium)，该菌来自长期受高效氯氟氰菊酯污染的土壤，经人工富集驯化培养，分离纯化得到，命名为LB1。该菌为革兰氏阴性菌，菌体呈短杆状，菌落颜色为白色，不透明，表面湿润光滑，凸起，边缘整齐，易挑取，其最适生长条件为：pH7.0～ 8.0，温度25～30℃。

本发明高效氯氟氰菊酯降解菌的分离方法包括以下步骤：

(1)从长期喷施高效氯氟氰菊酯的土壤中通过富集驯化的方法筛选对高效氯氟氰菊酯有降解作用的菌株。具体方法为：称取5g土样，加入装有100mL 无机盐培养基的培养瓶中，将培养瓶置于温度30℃，转速150r/min的恒温振荡培养箱中培养。其中无机盐培养基(g/L)：NH₄NO₃1.0g，NaCL 1.0g，KH₂PO41.5g， K₂HPO₄0.5g，MgSO₄0.1g，FeSO₄0.025g，去离子水1000mL，调节pH为7.0。

(2)步骤(1)培养瓶培养5d后，取出静置，取上清液5mL转接入含 100mL50mg/L高效氯氟氰菊酯的无机盐培养基的培养瓶中，将培养瓶再置于温度30℃，转速150r/min的恒温条件下进行以高效氯氟氰菊酯为唯一碳源和能源的振荡富集培养。