[发明专利]一种同时检测总抗体和中和抗体的方法

说明书

本发明涉及抗体检测领域，具体而言，涉及检测方法及检测组件，按本发明方法制备的新冠检测试剂能够同时检测总抗体和中和抗体，可以检测疫苗接种后的免疫保护情况。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体而言，涉及一种抗体检测方法。

背景技术

病原微生物侵染细胞过程中病毒表面受体结合蛋白是病原微生物进入细胞的关键“钥匙”，可以打开细胞受体蛋白的“锁”，从而进入细胞并启动其复制过程。

中和抗体是B淋巴细胞产生的某些抗体，能够与病原微生物表面的抗原(配体)结合，从而阻止该病原微生物黏附靶细胞受体，防止侵入细胞。

目前的中和抗体检测主要在生物安全三级实验室(BSL3)内进行。利用活病毒细胞培养的中和试验检测，对实验室等级要求高，严重限制了临床大规模的推广使用。开发出可在生物安全二级实验室(BSL2)或普通实验室开展的快速中和抗体检测方法，具有重要意义。当前也有一些研究团队开发了ELISA类测试，来满足BSL2类检测的需求，但是检测试剂仅能单独检出中和抗体无法同时检测出总抗体。检测总抗体可以反映接种疫苗后是否产生抗体，检测中和抗体可以反映接种疫苗后是否获得中和抗体免疫效果，指导个体免疫接种方案的调整，判断是否需要调整免疫接种策略。从而提升群体免疫保护性的辅助支撑，具有重大意义。检测总抗体和中和抗体不仅能更客观的反应机体当前的免疫情况，还能用于分析机体过去或者未来对病原微生物的免疫判断和预测。

SARS-CoV-2表面棘突S蛋白(spike protein)是冠状病毒表面重要的受体结合位点，其可与细胞表面病毒特异性受体结合、介导病毒外膜与细胞融合、病毒吸附及穿膜；冠状病毒S蛋白受体结合域(receptor binding domain， RBM)可使病毒与宿主细胞表面的血管紧张素转化酶 2(angiotensin-converting enzyme2，ACE2)结合，并使病毒进入宿主细胞。当 SARS-CoV-2在侵入机体时，会刺激机体产生具有保护作用的中和抗体，专门阻止病原微生物进入细胞，防止感染。中和抗体的多少是疫苗免疫保护效果的一项重要指标，是疫苗评估和质控的重要依据。

个体接种疫苗后可通过免疫应答产生保护性抗体，即中和抗体，对中和抗体进行滴度测定，可以判断疫苗的临床疗效。因此对中和抗体的检测，可应用于疫苗的研发评价，以及疫苗接种后，对个体自身免疫效果的评价。另外，对于治愈后的新冠患者检测，可以判断是否存在再次感染的风险。

当前疫苗的开发思路是基于RBD-ACE2侵染机制，其核心片段是针对 RBD设计，一些治疗方案也是基于阻断RBD-ACE2途径的抗体开发。

随着新冠疫苗的推广接种，现在急需开发一种方便快捷，无需在BSL3 实验室条件下进行总抗体和中和抗体检测的试剂。

现有的新冠抗体检测试剂仅能单独检测总抗体或者中和抗体，总抗体和中和抗体不能够进行同时检测。本发明的优点在于能够同时检测样品中的总抗体和中和抗体。在数据判读上也能够带来方便，同时检测总抗体和中和抗体可以对测试结果纠偏，例如当总抗体检测为阴性中和抗体为阳性时可以反馈检测结果存在异常，需要复检。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明提供了以下至少一种实施方式：

本发明提供了检测方法，包括：

一种抗体的检测方法，所述方法包括：

步骤1：样品与配体或含配体的片段接触，检测反应信号；

步骤2：再与所述配体的受体或其片段接触，检测反应信号。

其特征在于，所述检测方法可以检测中和抗体和/或总抗体，通过步骤 1检测的是能够结合所述配体的总抗体，步骤2检测的是结合所述配体的中和抗体。