[发明专利]一种肝硬化及肝炎人群早期肝癌诊断标志物的筛选方法

说明书

本发明涉及临床医学诊断技术领域，尤其涉及一种肝硬化及肝炎人群早期肝癌诊断标志物的筛选方法。一种肝硬化及肝炎人群早期肝癌诊断标志物的筛选方法，包括以下步骤：S1、数据获取，收集目标血浆样本并检测血浆样本中的代谢物；S2、判别模型构建，所述判别模型包括：区分肝硬化人群与原发性肝癌患者、区分肝炎人群与原发性肝癌患者；S3、筛选标志物；S4、诊断能力验证。本发明提供了一种利用高效液相色谱‑质谱联用系统获得肝硬化、肝炎、及肝细胞肝癌患者血浆的代谢轮廓，寻找潜在肿瘤代谢标志物组，构建诊断模型，用于辅助肝癌高危人群的肿瘤早期诊断的肝硬化及肝炎人群早期肝癌诊断标志物的筛选方法。

技术领域

本发明涉及临床医学诊断技术领域，尤其涉及一种肝硬化及肝炎人群早期肝癌诊断标志物的筛选方法。

背景技术

原发性肝癌是肝硬化最严重并发症之一，目前肝癌的5年生存率普遍低于20％，病死率占我国恶性肿瘤的第二位。早期肝癌无特异性临床症状，无明显阳性体征或仅有类似肝硬化体征，当出现明显临床症状和体征时肝癌已处于中晚期，极大地影响了肝癌的治愈率及预后。因此对高危人群定期监测、早期诊治可有效延长患者生存期。高危人群可视为：有肝癌家族史、高病毒载量、病程长、合并多种病毒感染或伴随有嗜酒、肥胖和糖尿病等危险因素的肝硬化的患者。

血清甲胎蛋白作为肝癌相对特异的血清诊断学指标，联合肝脏影像学检查在临床肝癌筛查中已广泛应用。但约有30％～40％的肝癌患者AFP呈阴性。同时AFP在一些肝硬化及肝炎患者中亦可升高。因此，研究新的肿瘤标记物，作为肝癌筛查及诊断的重要补充，对肝癌的早期诊断意义重大。

代谢组学(metabolomics)是20世纪90年代中期发展起来的一门新兴学科，是对一个生物系统的细胞在特定时间和条件下所有小分子代谢物质的定量或半定量分析，与基因组学和蛋白质组学相比，代谢组学与生理学的联系更加紧密并可从整体上解析生物体系的功能和状态。当疾病导致机体的生理过程发生非正常变化，并引起代谢产物含量发生相应的改变时，我们可通过对代谢产物进行分析，寻找疾病的生物标志物，并通过生物标志物构建较好的疾病诊断方法。目前采用代谢组学方法筛选肝癌早期诊断的生物标志物逐渐成为研究热点。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的缺陷，提供了一种利用高效液相色谱-质谱联用系统获得肝硬化、肝炎、及肝细胞肝癌患者血浆的代谢轮廓，寻找潜在肿瘤代谢标志物组，构建诊断模型，用于辅助肝癌高危人群的肿瘤早期诊断的肝硬化及肝炎人群早期肝癌诊断标志物的筛选方法。

为了实现以上目的，本发明采用以下技术方案：

一种肝硬化及肝炎人群早期肝癌诊断标志物的筛选方法，包括以下步骤：

S1、数据获取，收集目标血浆样本并检测血浆样本中的代谢物，获得代谢物定性信息和相对含量的二维矩阵；

S2、判别模型构建，基于步骤S1所得的二维矩阵构建判别模型并筛选差异代谢物，所述判别模型包括：区分肝硬化人群与原发性肝癌患者、区分肝炎人群与原发性肝癌患者；

S3、筛选标志物，将步骤S2所得的差异代谢物二维矩阵进行交叉验证，获得早期筛查诊断标志物；

S4、诊断能力验证，通过支持向量机及随机森林判别模型对步骤S3所得的诊断标志物在肝炎及肝硬化患者的肝癌早期诊断中的诊断能力进行验证。

其中，肝炎人群早期肝癌诊断标志物包括：肌酐、鞘氨醇、(1S,5R)-2-甲基-5-(1-甲基乙烯基)-2-环己烯-1-醇、D-半乳糖、D-葡萄糖、胆红素、半乳糖鞘氨醇、二十二碳六烯酸、对苯二酚；肝硬化人群早期肝癌诊断标志物包括：6-磷酸海藻糖、脱氧腺苷、γ-亚麻酸、棕榈酸、乙醇酸、二十二碳六烯酸、抗坏血酸、花生四烯酸、胆绿素、6-磷酸葡萄糖、1-磷酸葡萄糖、假尿苷、尿苷、1-甲基腺苷、17a-乙炔雌二醇。

具体地，9种肝炎人群早期肝癌诊断标志物，在原发性肝癌患者中均呈不同程度的下降趋势。