[发明专利]一种三七花蛋白的制备方法及应用在审
| 申请号： | 202110040688.6 | 申请日： | 2021-01-13 |
| 公开（公告）号： | CN112521443A | 公开（公告）日： | 2021-03-19 |
| 发明（设计）人： | 曲媛;魏馨瑶;唐美玲;刘迪秋 | 申请（专利权）人： | 昆明理工大学 |
| 主分类号： | C07K1/18 | 分类号： | C07K1/18;C07K1/16;C07K1/34;C07K1/14;A23L33/185;A23J1/00;A61K38/01;A61P31/10 |
| 代理公司： | 昆明同聚专利代理有限公司 53214 | 代理人： | 苏芸芸 |
| 地址： | 650093 云*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 三七 蛋白 制备 方法 应用 | ||
1.一种三七花蛋白的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：
（1）在粉碎的三七花鲜品中加入其质量5~10倍的pH=7~8、浓度0.01mol/L的Tris-HCl缓冲液充分浸泡24h，使得三七花各部位细胞溶胀破裂，浸提液过滤后，滤渣二次加入Tris-HCl缓冲液充分浸泡过滤，合并滤液，滤液离心取上清，即得三七花总蛋白提取液；
（2）将三七花总蛋白提取液装入截留分子量为10 kDa的透析袋中，于4℃透析12~24 h，收集内滤液，冻干后即为三七花总蛋白粉；
（3）将三七花总蛋白粉用0.01 mol/L、pH=7~8的Tris-HCl缓冲液溶解后，用DEAE离子交换柱层析对其进行分离纯化，采用NaCl溶液梯度洗脱，收集0.1~0.2 mol/L NaCl溶液洗脱的洗脱液，洗脱液采用截留分子量为10kDa透析袋于4℃透析12~24h，收集内滤液，冻干后备用；
（4）将步骤（3）冻干品用0.01mol/L、pH=7~8的Tris-HCl缓冲液溶解，采用Sephadex G-50 凝胶柱分离，采用NaCl溶液进行梯度洗脱，洗脱流速0.2mL/min，采用紫外分光光度仪在280nm下检测，收集第一个吸收峰的洗脱液，再采用截留分子量为10kDa透析袋于4℃透析12~24 h，收集内滤液，冻干后得到三七花蛋白PNP1。
2.根据权利要求1所述的三七花蛋白的制备方法，其特征在于：步骤（4）中采用浓度在0.1~1mol/L范围内的NaCl溶液进行梯度洗脱。
3.权利要求1所述的三七花蛋白的制备方法制得的三七花蛋白PNP1在制备抗菌食品或抗菌药物中的应用。
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