[发明专利]下调YTHDF2蛋白表达的物质及其应用

说明书

本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种下调YTHDF2蛋白表达的物质及其应用；该下调YTHDF2蛋白表达的物质包括基于YTHDF2的小干扰RNA或YTHDF2shRNA的内皮特异性腺相关病毒，可应用于制备治疗心血管疾病药物；本发明开拓了动脉粥样硬化相关血管疾病防治药物制备的新方法，对于动脉粥样硬化相关血管疾病的防治提供了新的方向。

技术领域

本发明涉及基因工程技术领域，特别是一种下调YTHDF2蛋白表达的物质及其在制备治疗心血管疾病药物中的应用。

背景技术

心血管疾病(Cardiovascular disease,CVD)是目前全球威胁人类健康最严重的疾病。心血管疾病可由多种因素引起，一些不良的生活习惯(吸烟、嗜酒、缺乏体育锻炼)，以及糖尿病、高血压、高胆固醇等一些慢性疾病。在多种心血管疾病中，动脉粥样硬化是其共同的病理生理学过程。

动脉粥样硬化是一种由脂质潴留在动脉壁形成以斑块为特征的慢性血管炎性疾病，许多研究发现血管内皮损伤是其形成的始动因素。血管内皮细胞(Endothelial cell,EC)是一层连续覆盖在血管腔内表面的扁平鳞状细胞，对血管内皮功能起着重要的调控作用。当存在糖尿病、血脂和血流动力学异常等刺激时，EC受损发生功能紊乱(Endothelialcell dysfunction,ECD)，包括局部渗透增强、俘获和修饰循环血中的脂蛋白颗粒、选择性募集单核细胞进入内膜下分化成巨噬细胞并将修饰的脂蛋白内化成为泡沫细胞，同时，诱导相邻的平滑肌细胞增殖和迁移覆盖在坏死核心表面形成斑块。随着斑块内炎症环境的加剧和纤维帽的降解，最终斑块破裂，引发严重的CVD事件。

N6-甲基腺苷(m6A)作为一种转录后表位剪切修饰，是真核生物的信使RNA(mRNA)中最丰富的修饰之一。甲基转移酶复合物(METTL3,METTL14,WTAP和KIAA1429)可以增加mRNA的m6A修饰，去甲基酶(FTO和ALKBH5)可以降低mRNA的m6A修饰，同时，这些发生m6A修饰的mRNA可被识别蛋白(YTHDF1-3,YTHDC1-2，和HNRNP家族蛋白)识别和结合。m6A甲基化的不同转录后结果依赖于其识别蛋白。YTHDF2(YTH domain family 2)是最有效的m6A阅读器，通过识别含有m6A的mRNA并将其分配到加工体，削弱了mRNA的稳定性。

RNA干扰(RNA interference，RNAi)指的是，将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞，可以使mRNA发生特异性的降解，导致其相应的基因沉默的现象。由于使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达，所以该技术已被广泛用于探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的基因治疗领域。小干扰RNA(siRNA)，有时称为短干扰RNA或沉默RNA，是一类双链RNA分子，长度为20-25个碱基对，类似于miRNA，并且在RNA干扰(RNAi)途径内操作。它干扰了表达与互补的核苷酸序列的特定基因的转录后降解的mRNA，从而防止翻译。

目前，已有文献报道YTHDF2在肿瘤、造血干细胞(HSCs)内环境稳定和造血再生的调节中发挥作用，然而，YTHDF2在心血管疾病中的作用及其机制目前尚未有任何相关的研究和报道。

发明内容

针对上述问题，本申请提供一种下调YTHDF2蛋白表达的物质及其在制备治疗心血管疾病药物中的应用。

首先，本申请提供了一种下调YTHDF2蛋白表达的物质，包括基于YTHDF2的小干扰RNA和YTHDF2 shRNA的内皮特异性腺相关病毒。