[发明专利]低温耐盐性改变的菊粉酶突变体MutS117N及其应用

权利要求书

1.一种低温耐盐性改变的菊粉酶突变体MutS117N，其特征在于，所述的菊粉酶突变体MutS117N的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.权利要求1所述突变体MutS117N的编码基因mutS117N，其特征在于，所述的编码基因mutS117N的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.包含权利要求2所述的编码基因mutS117N的重组载体。

4.包含权利要求2所述的编码基因mutS117N的重组菌。

5.权利要求1所述的低温耐盐性改变的菊粉酶突变体MutS117N的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示的野生外切菊粉酶基因inuAMN8和表达载体pEasy-E1相连接，获得包含inuAMN8的重组表达质粒pEasy-E1-inuAMN8；

2)以质粒pEasy-E1-inuAMN8为模板，设计突变引物5'TTACACCAACGCCTACAGTGACGCCGCGCCGC3'和5'TGTAGGCGTTG GTGTAAATGGCCACCAGCGGG3'，通过PCR扩增得到包含mutS117N的重组表达质粒pEasy-E1-mutS117N；

3)将重组表达质粒pEasy-E1-mutS117N转化大肠杆菌，获得包含mutS117N的重组菌株；

4)培养重组菌株，诱导重组菊粉酶突变体MutS117N表达；

5)回收并纯化所表达的重组菊粉酶突变体MutS117N；

6)活性测定。

6.权利要求1所述的突变体MutS117N在酿酒制备中的应用。