[发明专利]一种朱顶红优质种苗组织培养快速繁殖方法

权利要求书

1.一种朱顶红优质种苗组织培养快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：

a、外植体消毒：将朱顶红鳞茎作为外植体去除叶片和根系，将鳞茎盘切下并切割，鳞茎盘带长度为2-3厘米的鳞茎，将切割后的鳞茎盘进行消毒处理后，接种到不定芽诱导培养基上进行初代培养，培养温度24-30℃，光照3000-3500lx，光照12-16小时/天，所述的不定芽诱导培养基每升含有：6-苄基嘌呤5.0-10.0毫克、噻苯隆0.5-1.0毫克、蔗糖30克、琼脂6.0-6.5克，余量为MS培养基，pH 5.8-6.0；

b、不定芽诱导：将初代培养的鳞茎盘转入新的所述的不定芽诱导培养基上继续初代培养，培养基表面加头孢霉素溶液，培养温度24-30℃，光照3000-3500lx，光照12-16小时/天，鳞茎盘基部形成不定芽；

c、不定芽初代增殖：将初代培养形成的不定芽转入不定芽初代增殖培养基上继代培养，培养温度24-30℃，光照3000-3500lx，光照12-16小时/天，获得丛生芽；所述的不定芽初代增殖培养基每升含有：6-苄基嘌呤5.0-10.0毫克、噻苯隆0.5-1.0毫克、硝酸银1.0-5.0毫克、蔗糖30克、琼脂6.0-6.5克，余量为MS培养基，pH 5.8-6.0；

d、不定芽壮苗培养：将继代培养获得的丛生芽切割成单芽后放入壮苗培养基上进行壮苗培养，培养温度24-30℃，光照3000-3500lx，光照12-16小时/天，单芽基部形成鳞茎；所述的壮苗培养基每升含有：6-苄基嘌呤3.0-5.0毫克、蔗糖40-60克、琼脂6.0-6.5克，余量为改良MS培养基，pH 5.8-6.0；

e、小鳞茎分切增殖：将步骤d获得的鳞茎切割后接种到增殖培养基上培养，培养温度24-30℃，光照3000-3500lx，光照12-16小时/天，鳞茎形成丛生芽；获得的丛生芽能用于生根培养或重复步骤d和e进行继代增殖培养；所述的增殖培养基每升含有：6-苄基嘌呤5.0-10.0毫克、噻苯隆0.5-1.0毫克、蔗糖30克、琼脂6.0-6.5克，余量为MS培养基，pH 5.8-6.0；

f、生根培养：将获得的丛生芽切成单芽后接种到生根培养基上进行生根，培养温度24-30℃，光照3000-3500lx，光照12-16小时/天，获得试管苗；所述的生根培养基每升含有：吲哚丁酸0.5-1.0毫克、萘乙酸0.5-1.0毫克、蔗糖40-60克、香蕉匀浆50-100克、琼脂6.0-6.5克，余量为改良MS培养基，pH 5.8-6.0；

g、试管苗移栽：将试管苗转移到自然光下炼苗，然后洗净根部的培养基，移入栽培基质中培养，获得朱顶红种苗；

所述的外植体是通过以下预处理方法获得的：选择成年朱顶红鳞茎为材料，在选取外植体消毒之前的42天前，先用50%多菌灵可湿性粉剂500-800倍稀释液浇灌一次并喷施叶片，7天后用72%农用链霉素可溶性粉剂3000-4000倍稀释液浇灌一次并喷施叶片，然后每过7天，用72%农用链霉素可溶性粉剂3000-4000倍稀释液浇灌一次并喷施叶片，最后1次浇灌72%农用链霉素可溶性粉剂3000-4000倍稀释液后7天，选取处理过的朱顶红鳞茎为外植体；

所述的改良MS培养基是NH₄NO₃和KNO₃改变为原来的1.5倍，其余成分不变；

所述的将切割后的鳞茎盘进行消毒处理具体为：将切割后的鳞茎盘浸泡在体积分数75%酒精中10-30秒，用1.0%有效氯的次氯酸溶液浸泡8-10分钟，无菌水冲洗4-5次，再用质量分数0.1%升汞溶液消毒8-10分钟，无菌水冲洗4-5次，然后置于医用链霉素1500-2000倍稀释液中振荡24小时；

所述的头孢霉素溶液为浓度为30-50毫克/升的头孢霉素水溶液。

2.根据权利要求1所述的朱顶红优质种苗组织培养快速繁殖方法，其特征在于，所述的栽培基质包括泥炭、椰糠和珍珠岩，所述的泥炭、椰糠和珍珠岩的体积比为3：3：1。

3. 根据权利要求1所述的朱顶红优质种苗组织培养快速繁殖方法，其特征在于，所述的朱顶红为圣茵1号朱顶红（Hippeastrum ‘Shengyin No.1’）、圣茵3号朱顶红（Hippeastrum‘Shengyin No.3’）或双艳朱顶红（Hippeastrum ‘Shuangyan’） 。