[发明专利]高效转化鹅去氧胆酸合成熊去氧胆酸的重组酵母菌株、构建与应用在审
申请号: | 202110054935.8 | 申请日: | 2021-01-15 |
公开(公告)号: | CN112852652A | 公开(公告)日: | 2021-05-28 |
发明(设计)人: | 史劲松;徐国强;许正宏;李会;龚劲松 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N1/19 | 分类号: | C12N1/19;C12N15/53;C12N15/81;C12P33/02;C12P33/06;C12P33/00;C12R1/865 |
代理公司: | 无锡承果知识产权代理有限公司 32373 | 代理人: | 张婷婷 |
地址: | 214122 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 高效 转化 鹅去氧 胆酸 合成 熊去氧 重组 酵母 菌株 构建 应用 | ||
1.一种高效转化鹅去氧胆酸合成熊去氧胆酸的重组酵母菌株,其特征在于:以酵母菌株S.cerevisiae CEN.PK2-1C为出发菌株,转入含有7α-HSDH和7β-HSDH基因的重组表达质粒获得的工程菌。
2.根据权利要求1所述的高效转化鹅去氧胆酸合成熊去氧胆酸的重组酵母菌株,其特征在于:所述7α-HSDH基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,所述7β-HSDH的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
3.根据权利要求1所述的高效转化鹅去氧胆酸合成熊去氧胆酸的重组酵母菌株,其特征在于:所述重组酵母菌株名称为S.cerevisiae CEN.PK2-1C 7α-HSDH↑7β-HSDH↑。
4.根据权利要求1-4任一所述的高效转化鹅去氧胆酸合成熊去氧胆酸的重组酵母菌株的构建方法,其特征在于:包括下列步骤:
(1)构建含有7α-HSDH和7β-HSDH基因的重组表达质粒:将7α-HSDH和7β-HSDH基因插入穿梭载体pY15TEF1和pYX212中,得到重组表达质粒pY15TEF1-7α-HSDH和pYX212-7β-HSDH;
(2)将所述重组表达质粒转化入所述酵母菌株S.cerevisiae CEN.PK2-1C中。
5.根据权利要求4所述的高效转化鹅去氧胆酸合成熊去氧胆酸的重组酵母菌株的构建方法,其特征在于:重组酵母菌株所用培养基为YNB培养基。
6.如权利要求1-3任一所述的高效转化鹅去氧胆酸合成熊去氧胆酸的重组酵母菌株在生产熊去氧胆酸中的应用。
7.如权利要求6所述的应用得到的熊去氧胆酸。
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