[发明专利]一种全自动微生物核酸提取检测装置及提取检测方法有效
申请号: | 202110055239.9 | 申请日: | 2021-01-15 |
公开(公告)号: | CN112725162B | 公开(公告)日: | 2022-03-01 |
发明(设计)人: | 武艳;王蒙;于成琳;周雪冬;于松;胡佩雯;韩睿宁 | 申请(专利权)人: | 山东大学 |
主分类号: | C12M1/34 | 分类号: | C12M1/34;C12M1/33;C12M1/24;C12M1/02;C12M1/00;C12N15/10;C12Q1/6806;G01N35/04 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 张晓鹏 |
地址: | 266237 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 全自动 微生物 核酸 提取 检测 装置 方法 | ||
本发明涉及一种全自动微生物核酸提取检测装置及提取检测方法。包括机械臂、若干试剂管、低温等离子体发生装置、磁针探头、加热棒、导液管,机械臂包括若干机械手臂,机械臂分别与试剂管的端口、低温等离子体发生装置、磁针探头、加热棒配合连接,低温等离子体发生装置、磁针探头、加热棒分别配合伸入试剂管中,若干试剂管的底部分别与导液管连接,试剂管与导液管之间活动连接,连接处设置开关,使试剂管与导液管之间连通或闭合。高效快速高通量完成样品核酸的提取与分析,可用于各种场地气体、固体、液体样品中微生物核酸的提取与分析,提高工作效率。
技术领域
本发明属于检测装置技术领域,具体涉及一种全自动微生物核酸提取检测装置及提取检测方法。
背景技术
公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解,而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
在核酸检测试验中,获得高纯度的核酸是最重要的步骤之一,和后续的基因扩增、测序、杂交和克隆等应用分析紧密相关。常用的微生物核酸提取技术,包括苯酚-氯仿法、盐析法、硅相吸附法、离子交换法等。这些传统的核酸提取方法有耗时较长、提取效率较低、繁琐的劳力操作等不足,很大程度限制了操作人员的工作效率和核酸产物质量。此外,这些提取技术需要频繁的离心步骤,既不适用于核酸快速自动化提取,也不适用于样品较多时的高通量提取。
近年来,基于纳米磁珠吸附的核酸自动提取技术受到广泛关注和应用。该方法的原理是:核酸可以依靠静电作用、疏水作用和氢键作用结合到磁珠上,尤其是经过表面修饰的超顺磁性氧化硅纳米磁珠可与核酸进行快速“特异性结合”,形成“核酸-磁珠复合物”;在外加磁场的作用下,复合物分离出来;最后经过洗脱液洗去非特异性吸附的杂质、去盐、纯化后,得到目标核酸物质。此外,低温等离子体因其含有可以快速破坏微生物结构的带电粒子流等物质,故在核酸提取裂解的过程中,可以通过低温等离子体来破坏微生物结构,使其释放核酸物质,且不损坏核酸。虽然目前国内外都有商业化的等离子体设备。但由于这些仪器体积较大、需外接电源等,目前主要还是应用于实验室消杀研究。
发明内容
针对上述现有技术中存在的问题,本发明的目的是提供一种全自动微生物核酸提取检测装置及提取检测方法。
为了解决以上技术问题,本发明的技术方案为:
第一方面,一种全自动微生物核酸提取检测装置,包括机械臂、若干试剂管、低温等离子体发生装置、磁针探头、加热棒、导液管,机械臂包括若干机械手臂,机械臂分别与试剂管的端口、低温等离子体发生装置、磁针探头、加热棒配合连接,低温等离子体发生装置、磁针探头、加热棒分别配合伸入试剂管中,若干试剂管的底部分别与导液管连接,试剂管与导液管之间活动连接,连接处设置开关,使试剂管与导液管之间连通或闭合。
将磁珠法DNA提取流程进行精细化和机械化,通过机械臂将核酸提取分析不同功能区自动串联运行,并加以等离子体处理裂解样品,高效快速高通量完成样品核酸的提取与分析,可用于各种场地气体、固体、液体样品中微生物核酸的提取与分析,提高工作效率。
第二方面,利用上述的全自动微生物核酸提取检测装置进行提取检测方法,具体步骤为:
利用机械臂将样品放入低温等离子体裂解管,在等离子体的作用下,细胞发生裂解,释放其中的核酸物质,得到混合溶液;
混合溶液进入到磁珠吸附管,核酸物质与磁珠进行接触吸附,磁珠吸附管控制排出液体;
机械臂利用磁针探头伸入到磁珠吸附管内,将磁珠吸附到磁针探头中,然后转移到洗涤管中进行洗涤,然后转移到洗脱管中进行洗脱;
洗脱后的核酸液体转移到DNA产物存放管,然后利用机械臂转移到DNA检测装置进行检测。
本发明一个或多个技术方案具有以下有益效果:
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