[发明专利]一种FBXW7环状RNA的改构体及其在肿瘤药物和新冠疫苗中的应用

说明书

本发明涉及一种在天然的FBXW7环状RNA的基础上，进行大量的人工序列改造后的环状RNA改构体，该改构体具有优良的翻译以及翻译终止作用，在改构体的插入位点插入适当的蛋白质编码RNA序列之后，可以在体内表达该蛋白，蛋白的不同可以具有不同的效应，可以来制备肿瘤治疗药物也可以用来制备新冠疫苗。

技术领域

本发明属于生物技术应用领域 ，具体地涉及种FBXW7环状RNA的改构体，进人工序列改造后的环状RNA改构体，该改构体具有优良的翻译以及翻译终止作蛋白质编码RNA序列之后，可以在体内表达该蛋白，蛋白的不同可以具有不同的效应，可以来制备肿瘤治疗药物也可以用来制备新冠疫苗。

背景技术

疫苗是将病原微生物及其代谢产物，经过人工减毒、灭活或利用转基因等方法制成的用于预防传染病的自动免疫制剂。接种疫苗是预防传染病的有效方法。疫苗可增强免疫力，并使个体对病原体感染具有抵抗力。疫苗可能含有减毒活病原体（通常是病毒），灭活的完整病原体，类毒素（导致疾病的细菌产生的毒素的灭活形式）或病原体的一部分（例如天然或重组蛋白，多糖，结合多糖或病毒） -类粒子）,也可能含有佐剂以刺激免疫反应。按其性质可分为减毒活疫苗、灭活疫苗、抗毒素、亚单位疫苗（含多肽疫苗）、载体疫苗、核酸疫苗等。

mRNA是介于蛋白质编码DNA的翻译和核糖体在细胞质中产生蛋白质之间的中间步骤。与基于pDNA和基于病毒载体的疫苗相比，基于mRNA的疫苗具有多个优势。mRNA疫苗不会产生感染性颗粒或不会整合到宿主细胞的基因组中。它们可以原位递送以表达抗原，而无需穿过核膜屏障进行蛋白质表达，并且可以表达复杂的抗原而无包装限制。使用完全合成的生产工艺，可以在获得基因序列信息的几天之内快速生产mRNA疫苗。该平台具有多功能性，可适应多个目标，因此非常适合对新兴病原体的快速反应。目前正在研究两种主要类型的RNA作为疫苗：非复制性mRNA和病毒衍生的自扩增RNA。常规的基于mRNA的疫苗编码目标抗原，并包含5'和3'非翻译区（UTR），而自扩增RNA不仅编码抗原，而且还编码能够使细胞内RNA扩增和丰富的蛋白质表达的病毒复制机制。mRNA疫苗具有强大的潜力，快速开发的能力以及低成本生产和安全管理的潜力，因此可以替代常规疫苗。然而，直到最近，由于mRNA的体内递送的不稳定性和低效，它们的应用受到了限制。现在，最新的技术进步已在很大程度上克服了这些问题，针对传染病和多种类型癌症的多种mRNA疫苗平台已在动物模型和人类中证明了令人鼓舞的结果。

环状RNA (circRNA)是一种封闭结构的内源性长链非编码RNA,是通过对前体mRNA(pre-mRNAs)片段的反向剪切后并以共价键形式首尾相连而形成，被认为是非编码RNA这一大家族中最为稳定的RNA分子。circRNA可以影响重要mRNA的衰变，翻译和转录，从而影响控制健康和疾病的基因表达程序。在过去circRNA因其编码蛋白基因的起始密码子和/或终止密码子被删除故被认为是一种不能被编码为蛋白质的长链非编码RNA。但近年来研究发现，部分circRNA可以编码为特定的蛋白质来影响肿瘤的发生发展。尽管尚未完全了解circRNA的产生方式，但许多是通过反向剪接反应共价连接pre-mRNA特定片段的5'和3'末端（跨越外显子或外显子与内含子的组合）而产生的，而规范剪接有助于生成一些内含子circRNA。鉴于circRNA缺少暴露的5'和3'末端，因此可以保护它们免受核酸外切酶降解，因此通常认为它们比其线性宿主转录物更稳定。circRNA翻译时只能采用与帽无关的方式,除了M6A介导的翻译，人工和含有内部核糖体进入位点（IRES），其直接招募核糖体，也可译为蛋白质。这两种方法可以彼此耦合。例如circRNA以独立于IRES的方式经历滚环扩增，从而导致生产力比线性转录本高100倍。值得注意的是， circRNA还可以与剪接因子，转录因子和RNA结合蛋白（RBP）相互作用，并且某些circRNA可以与核糖体结合并进行翻译。

发明内容

本发明的目的在于提供一种FBXW7环状RNA的改构体及其肿瘤与新冠疫苗中的应用。