[发明专利]处理nisin废水pH的菌种筛选、应用及处理方法

说明书

本发明公开了一种处理nisin废水pH的菌种筛选、应用及处理方法，所述方法为从土壤中筛选出可直接在nisin废水中生长繁殖并能够处理nisin废水的菌种，得到了一株菌株，经鉴定为宛氏拟青霉具有耐酸、抗nisin的性能，在培养基中保持活力，利用发酵法将宛氏拟青霉接入nisin废水中，通气搅拌7～9天，即可使nisin废水的pH达到中性且COD下降60％～90％。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其是一种处理nisin废水pH的菌种筛选、应用及处理方法。

背景技术

Nisin是一种乳酸链球菌素的天然生物活性抗菌肽，是具有很强杀菌作用的小分子肽，由乳酸球菌属微生物代谢过程中合成和分泌的，是利用生物分离技术提取的一种安全、高效、纯天然的活性物质。目前，Nisin在我国的年产量已超过250吨，但是伴随Nisin生产的同时也会产生大量的发酵废液，所以我国每年超过5万吨废液排放量就是Nisin产生的。在生产乳酸链球菌生产后，提取Nisin后剩余的废弃物为Nisin发酵废水，具有C/N低、氯离子浓度高、pH低、COD高等特点，作为废弃液，直接排放的话将会对环境产生十分恶劣的影响。传统的废液处理方法是采用加水稀释，直至符合我国污水排放标准。但是该方法会浪费大量的水资源，同时并不符合工厂生产中低成本高效益的原则，不能适用于较大规模的生产。

目前的科研与生产中，为了使被处理发酵废水的各项指标达到国家规定的排放标准，对发酵废水处理的最终目的是去除Nisin废水中残留的糖等高浓度、有机营养物质和含有的蛋白质，提高Nisin废水的pH和降低废水的COD值。现阶段，Nisin发酵废水处理的方法有很多种，包括物理化学法、生化法、化学法、物理法、物理生物法，近几年还出现了超渗透压处理污水技术。

近几年才在国内应用到了污水处理领域的新技术是生化法污水处理技术。其原理是通过微生物的新陈代谢作用，将污水的污染物质通过生化反应分解为简单的无害物质，达到污水处理的目的。在国外生活污水的处理方面，生化法污水处理技术已经得到了尝试，并取得了较好的处理效果，且显示出了其处理效果好、成本低、工艺简单的特点。现在很多废水的处理都是用生化法，糖蜜废水处理的核心就是生化法，在70年代时腈纶废水就采用生化法处理，焦化废水的处理上国内各焦化企业大多采用生化法处理，但生化法处理nisin废水的方法还都处在实验室阶段，没有可行的工厂话方案，主要是nisin废水的pH过低，很多菌种都不生长或者生长太缓慢，而本发明解决的就是现有菌株处理nisin废水的问题，重新筛选出一株菌株，使其在工厂适用。

发明内容

本发明的目的是为了解决上述现有技术的不足而提供处理nisin废水pH的菌种筛选、应用及处理方法，提供一株新的菌种，方便工厂处理nisin废水。

为了实现上述目的，本发明所设计的一种处理nisin废水pH的菌种的筛选方法，具体采用以下步骤：

(1)土壤菌悬液的制备

从nisin废水排放口取土壤样品，接入无菌水，制成土壤菌悬液；

(2)土壤菌株的初筛

将nisin废水加入适量的琼脂制成平板，将土壤菌悬液涂布在平板上，放入28℃-37℃培养箱中培养，7天后得到2株菌株；

(3)土壤菌株的复筛

将(2)中得到的2株菌株用pH为4的PDA培养基培养3天，然后接入到nisin废水中28℃-30℃通气培养；当发现其中一株菌株优于另外一株时，经过测序鉴定为宛氏拟青霉。

作为优选，所述pH为4的培养基的原料分别是：马铃薯20％，葡萄糖2％，然后将马铃薯切碎煮沸30分钟，取汁加入2％的葡萄糖，最后用稀盐酸将pH调节到4。

本发明还公开了一种利用宛氏拟青霉处理废水的方法，将宛氏拟青霉应用在nisin废水处理上。