[发明专利]变形杆菌中金黄色葡萄球菌的分纯方法

说明书

本发明公开了变形杆菌中金黄色葡萄球菌的分纯方法，属于微生物分离纯化技术，具体涉及金黄色葡萄球菌分离纯化技术，以解决无法从变形杆菌中分纯金黄色葡萄球菌的缺陷，包括如下步骤：取生理盐水；向生理盐水中放入氨曲南药敏纸片，混匀得氨曲南药物液体；用棉签蘸取氨曲南药物液体；均匀涂抹在血琼脂平板，再静置5‑10分钟，得含有氨曲南药物的血琼脂平板；挑取变形杆菌和金黄色葡萄球菌的混合物，接种；培养箱中孵育16‑24小时，即分离出金黄色葡萄球菌。只要混合物中有金黄色葡萄球菌，就能准确分离出大量单个纯菌落，并且不被变形杆菌污染，可以直接用于药物敏感试验，大大缩短时间周期。

技术领域

变形杆菌中金黄色葡萄球菌的分纯方法，本发明属于微生物分离纯化技术领域，具体涉及金黄色葡萄球菌分离纯化技术领域。

背景技术

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)也称“金葡菌”，隶属于葡萄球菌属，为一种常见的食源性致病微生物，金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性，金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37℃，最适生长pH 7.4，平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径1-2mm，血平板菌落周围形成透明的溶血环，金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10-15％NaCl肉汤中生长，可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气，甲基红反应阳性，VP反应弱阳性，许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶，金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。

变形杆菌为能活泼运动而又极为多形性的一群肠道菌，有球形和丝状形，具有鞭毛、无荚膜、无芽胞、革兰氏阴性，运动活泼，在固体培养基上呈扩散生长，形成迁徙生长现象，若在培养基中加入0.1％石炭酸或0.4％硼酸可以抑制其扩散生长，形成一般的单个菌落，在SS平板上可以形成圆形、扁薄、半透明的菌落，易与其他肠道致病菌混淆，在血琼脂平板上有溶血现象。

因变形杆菌迁徙生长的特性，随着其的生长，菌落会覆盖整个培养基，让生长在其中的金黄色葡萄球菌无法分纯用于药物敏感试验，病人提供过来的临床标本中，金黄色葡萄球菌是致病菌，但会被变形杆菌污染，目前很好的的分纯方法。

发明内容

本发明的目的在于：变形杆菌中金黄色葡萄球菌的分纯方法，以解决现有的由于变形杆菌的前夕生长特性，无法从变形杆菌中分纯金黄色葡萄球菌的缺陷。

本发明采用的技术方案如下：

变形杆菌中金黄色葡萄球菌的分纯方法，包括如下步骤：

步骤1、取2ml浓度为0.45-0.9％的生理盐水；

步骤2、向生理盐水中放入1片或1片以上的氨曲南药敏纸片(大小6mm，氨曲南含量30微升)，氨曲南药敏纸片用镊子夹取，混匀得氨曲南药物液体；

步骤3、用棉签蘸取氨曲南药物液体；

步骤4、均匀涂抹在血琼脂平板，再静置5-10分钟，得含有氨曲南药物的血琼脂平板；

步骤5、挑取变形杆菌和金黄色葡萄球菌的混合物，接种于含有氨曲南药物的血琼脂平板，再3区或4区划线；

步骤6、培养箱(用于细菌培养的常规的培养箱)中孵育16-24小时，即分离出金黄色葡萄球菌。