[发明专利]一种桑黄的快速育种方法有效
申请号: | 202110059524.8 | 申请日: | 2021-01-18 |
公开(公告)号: | CN112715351B | 公开(公告)日: | 2022-02-08 |
发明(设计)人: | 巫桂芬;周进林;邱兆新;陆启皇;农万廷 | 申请(专利权)人: | 广西民族师范学院 |
主分类号: | C12N15/04 | 分类号: | C12N15/04;A01H1/02;A01G18/40;A01G18/20 |
代理公司: | 南宁东智知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 45117 | 代理人: | 裴康明;黎华艳 |
地址: | 532200 广西壮*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 快速 育种 方法 | ||
1.一种桑黄的快速育种方法,其特征在于:以桑树桑黄与树舌灵芝作为两个杂交亲本进行培育;
具体包括以下步骤:
S1. 清洗桑黄和树舌灵芝子实体,在超净工作台中用灭菌刀分别切取两种菌肉放到菌肉培养基中进行培养;
S2. 挑取步骤S1培养好的菌丝到菌丝培养基内进行共培养,桑黄菌丝和树舌灵芝菌丝接种的距离为1.2~2.5cm;室温培养22~25h后依次加入0.2~0.4mg/mL氯化钙溶液和0.8~1.2mol/L的转移因子提取液,其中,每100mL的培养基加1~5滴氯化钙溶液和0.8~1.5mL转移因子提取液,并转移到36~40℃的恒温环境中培养32~38h,再转入10~14℃的恒温环境中继续培养3~6h,最后在室温下培养10~14h,挑取融合后的菌丝接种到灭菌的培养物料包中进行新种桑黄子实体的生产;
所述菌肉培养基由以下重量份的组分组成:马铃薯180~250份、桃木木屑粉8~20份、桑枝木屑粉8~20份、葡萄糖18~22份、琼脂15~20份、水800~1000份;
所述菌肉培养基的制备方法包括以下步骤:马铃薯、桃木木屑粉、桑枝木屑粉加入水,煮10~20min,过滤掉桃木木屑粉和桑枝木屑粉,再用滤液与葡萄糖、琼脂一起加热至溶解,最后调节pH为6.2~7.0;
所述菌丝培养基与所述菌肉培养基组分和制备方法相同;
所述培养物料包由以下重量份的组分组成:桃木木屑粉1~3份、桑枝木屑粉1~5份、甘蔗渣1~3份、麦麸1~2份、玉米粉1~2份、琼脂1~2份,混合后加水搅拌至有湿润感,装袋灭菌;
所述转移因子提取液,采用健康动物脾脏为原料,制成的含多肽、氨基酸和多核苷酸混合物的溶液,按标准号为WS1-(X-451)-2003Z提取获得。
2.根据权利要求1所述的桑黄的快速育种方法,其特征在于:
所述步骤S2中,接种的距离为2cm。
3.根据权利要求1所述的桑黄的快速育种方法,其特征在于:
所述步骤S2中,培养的具体过程包括:培养24h后依次加入0.3mg/mL氯化钙溶液和1.0mol/L的转移因子提取液,其中,每100mL的培养基加2滴氯化钙溶液和1mL转移因子提取液,并转移到38℃的恒温环境中培养36h,再转入12℃的恒温环境中继续培养4h,最后在室温下培养12h。
4.根据权利要求1所述的桑黄的快速育种方法,其特征在于:
所述36~40℃的恒温环境为恒温培养箱;所述10~14℃的恒温环境为冷柜。
5.根据权利要求1所述的桑黄的快速育种方法,其特征在于:
所述菌肉培养基由以下重量份的组分组成:马铃薯200份、葡萄糖20份、琼脂18份、蒸馏水1000份、桃木木屑粉10份、桑枝木屑粉10份,调节pH6.5。
6.根据权利要求1所述的桑黄的快速育种方法,其特征在于:
所述培养物料包由以下重量份的组分组成:桃木木屑粉2份、桑枝木屑粉3份、甘蔗渣2份、麦麸1份、玉米粉1份、琼脂1份,混合后加水搅拌至有湿润感,装袋灭菌。
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