[发明专利]一种牛奶外泌体负载淫羊藿苷纳米制剂的制备及应用

说明书

本发明提供了一种外泌体负载淫羊藿苷纳米制剂，该制剂采用牛乳外泌体负载淫羊藿苷，具体制备方法为：使用离心机4℃，13000‑15000g离心30min‑60min，取中层乳清，600‑800目真空泵过滤。4℃，100000‑150000g离心1‑2h，取中层乳清。1000‑2000目真空泵过滤，4℃，13000‑15000g离心1‑2h，留底部1‑2ml，集于50ml EP管中，4℃，100000‑150000g离心1‑2h，弃上清，分离出牛奶外泌体。在室温下以1：9的比例混合淫羊藿苷与外泌体悬浮液。冷冻干燥后即得外泌体负载淫羊藿苷纳米药物：该材料具有可获得性强、成本低、低毒性、产量高、可口服递送药物并且可以大规模生产的独特优点，可以潜在地增强口服药物生物利用度，提高药物的功效和安全性，并且提高藿苷的骨修复能力。

技术领域

本发明属药物制剂技术领域，更具体地，涉及一种牛奶外泌体负载淫羊藿苷纳米制剂的制备及应用。

背景技术

中药作为我国的传统特色药物，对多种疾病都有良好的治疗作用。中药来源的天然抗氧化剂淫羊藿苷能够提高机体免疫力，促进骨形成，被广泛用于骨质疏松及骨缺损相关疾病的研究。

但由于淫羊藿苷的低溶解度和低渗透性，造成其生物利用度低，难以发挥最佳治疗效果。临床需要研发一种能够提高其生物效能、利于机体吸收的载体，助其充分发挥功效。溶于乙醇、乙酸乙酯，难溶于水，不溶于脂、苯和氯仿。淫羊藿苷在生物药剂学分类系统(BCS)中，被归类为低溶解度，低渗透性，并且是生物利用度较差的IV类药物，这些不利的理化性能和药代动力学因素限制了其临床应用。临床急需研发一种药物载体，提高其生物利用度，充分发挥其生物效能。有很多学者尝试研究各种纳米材料负载淫羊藿苷以提高其效用性，但多数研究集中于使用合成的纳米粒子等外源性载体，而生物相容强且适合口服给药的内源性载体负载淫羊藿苷的研究仍然相当有限。

在近二十年中，纳米级药物递送系统(DDS)的研究已取得了许多进展，学者们使用了各种纳米载体来改善药物的化学及生物学性能。然而，这些纳米载体面临着两个重要的临床问题，一方面是材料的细胞毒性，另一方面是网状内皮系统(RES)或单核巨噬细胞系统(MPS)的快速清除。因此，FDA仅批准了少量的纳米级DDS递送系统用于人类的疾病治疗。与合成的纳米载体相比，内源性DDS由于其机体内天然生物相容性而在增强药物递送和治疗功效方面都显示出了卓越的效果。外泌体(Exosomes,Exo)是胞外囊泡(Extracellularvesicle,EV)的一种。EV通常包括外泌体(Exosome,直径约为30～150nm)、微泡(Microvesicle,直径约为100～1000nm)、凋亡小体(Apoptotic body,直径约为500～1000nm)。外泌体是胞浆内的多泡体与质膜融合释放到胞外的小EV，而微泡是由细胞膜出芽形成的较大EV。

外泌体是细胞间极为重要的媒介体系，它携带有蛋白质、mRNA、miRNA、脂质等遗传物质，通过它可以实现细胞间的物质交换和信息交流，在疾病的诊断和治疗方面均具有重要作用。近年来，外泌体作为药物载体的递送系统研究备受关注。外泌体作为药物的天然内源性载体具有独特优势，如其免疫原性低，在血液中的稳定性高，向细胞运输药物的效率高，能增强渗透滞留效应。外泌体负载的药物类型有小分子化学药物、蛋白质和肽、核酸药物等。外泌体负载药物首要考虑的就是外泌体的供体细胞选用，现在通常选用的是未成熟的树突细胞、间充质干细胞来源的外泌体，但是上述来源外泌体收集的量较少，成本高，并且有一定的毒性(间充质干细胞来源外泌体)。

因此，开发一种具有可获得性强、成本低、低毒性、产量高、可口服递送药物系统，提高淫羊藿苷吸收性、生物利用度，并且促进淫羊藿苷的骨修复能力，具有重要的研究意义和应用价值。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中淫羊藿苷吸收差、不适合长时间给药的缺陷，提供一种牛奶外泌体负载淫羊藿苷纳米制剂。该材料具有可获得性强、成本低、低毒性、产量高、可口服递送药物并且可以大规模生产的独特优点，可以潜在地增强口服药物生物利用度，提高药物的功效和安全性，并且提高藿苷的骨修复能力。