[发明专利]一种SARS-CoV-2中和抗体的检测方法、检测试剂盒

权利要求书

1.一种SARS-CoV-2中和抗体的检测方法，其特征在于，基于胶乳增强免疫比浊法实现SARS-CoV-2中和抗体检测，所述胶乳增强免疫比浊法为基于hACE2-RBD放大的胶乳增强免疫比浊检测，包括如下步骤：

制备试剂R1：第一胶乳微球标记SARS-CoV-2的S蛋白受体结合域RBD；

制备试剂R2：第二胶乳微球标记人hACE2；

两种标记胶乳微球形成竞争性比浊。

2.根据权利要求1所述的SARS-CoV-2中和抗体的检测方法，其特征在于，所述第一胶乳微球标记方法为：先将第一胶乳微球进行活化，在胶乳溶液中加入0.05~0.2M EDC，所述EDC的pH值范围为6.0~6.5，室温下，以转速100~500r/min的条件下搅拌反应0.5h，然后加入0.01~0.2M NHS反应10~30min，之后加入RBD蛋白进行偶联反应1~2h，等反应结束后加入封闭剂封闭2~3h，37℃老化12~48h即完成标记；

所述第二胶乳微球标记方法为：将第二胶乳微球活化，加入hACE2进行偶联，经过封闭后37℃老化12~48h。

3.一种SARS-CoV-2中和抗体检测试剂盒，其特征在于，包括试剂R1、试剂R2，所述试剂R1包括SARS-CoV-2的S蛋白受体结合域RBD标记的第一胶乳微球，所述试剂R2包括人hACE2标记的第二胶乳微球。

4.根据权利要求3所述的SARS-CoV-2中和抗体检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1中SARS-CoV-2的S蛋白受体结合域RBD标记的第一胶乳微球的质量比为0.15%～0.35％，所述试剂R2中人hACE2标记的第二胶乳微球的质量比为0.05~0.35%。

5.根据权利要求3所述的SARS-CoV-2中和抗体检测试剂盒，其特征在于，所述第一胶乳微球和第二胶乳微球为聚苯乙烯微球、聚丙烯酸微球和聚丙烯酸酯微球中的一种或多种，所述第一胶乳微球和第二胶乳微球均为羧基修饰微球。

6.根据权利要求3所述的SARS-CoV-2中和抗体检测试剂盒，其特征在于，所述第一胶乳微球的直径为100nm～400nm，所述第二胶乳微球的直径为50nm～200nm。

7.根据权利要求3-6任意一项权利要求所述的SARS-CoV-2中和抗体检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1和试剂R2还分别包括缓冲液、糖、盐、稳定剂、防腐剂、表面活性剂，所述缓冲液pH范围为6.0~7.5，所述糖的质量比为1％~5％，所述盐的质量比为1％~3％，所述稳定剂的质量比为0.5％~2％，所述防腐剂的体积比为0.5‰~2‰，所述表面活性剂的体积比为0.1‰~10‰。

8.根据权利要求3-6任意一项权利要求所述的SARS-CoV-2中和抗体检测试剂盒，其特征在于，还包括标准品和质控品，所述标准品为一系列低滴度到高滴度的SARS-CoV-2中和抗体溶液。