[发明专利]多能干细胞分化为自然杀伤细胞的培养液及分化方法

权利要求书

1.一种多能干细胞分化为自然杀伤细胞的培养液，其特征在于，所述培养液包括：体积比为1:0.9～1.3的DMEM/F12培养基和血细胞培养基，以及诱导因子、L-抗坏血酸、L-谷氨酰胺、L-亮氨酸、人血清白蛋白、转铁蛋白、β-巯基乙醇、亚硒酸钠、乙醇胺、微量元素A和微量元素B；所述诱导因子包括细胞生长因子、AHR抑制剂、去乙酰化酶抑制剂或Foxo1抑制剂中的一种或多种；

所述微量元素A包含CuSO₄·5H₂O、ZnSO₄·7H₂O、Selenite·2Na和Ferric citrate；

所述微量元素B包含MnSO₄·H₂O、Na₂SiO₃·9H₂O、Molydbic acid,ammonium salt、NH₄VO₃、NiSO₄·6H₂O和SnCI₂；

所述细胞生长因子包括干细胞因子、血管内皮细胞生长因子、胰岛素样生长因子I、FMS样酪氨酸激酶3配体、白介素15或白介素21中的一种或多种，所述细胞生长因子为人源重组细胞生长因子；所述人血清白蛋白和转铁蛋白为人源重组蛋白；所述AHR抑制剂选用StemReginin-1；所述去乙酰化酶抑制剂选用戊丙酸；所述Foxo1抑制剂选用AS1842856；

所述干细胞因子浓度为8～200ng/mL，所述血管内皮细胞生长因子浓度为4～100ng/mL，所述胰岛素样生长因子I浓度为10～100ng/mL，所述FMS样酪氨酸激酶3配体浓度为2～50ng/mL，所述白介素15浓度为2～50ng/mL，所述白介素21浓度为5～125ng/mL，所述L-抗坏血酸浓度为0.1～1mmol/L，所述人血清白蛋白浓度为10～15g/L，所述L-谷氨酰胺浓度为5～10mmol/L，所述L-亮氨酸浓度为0.5～5mmol/L，所述转铁蛋白浓度为10～100ng/mL，所述β巯基乙醇浓度为20～250μmol/L，所述乙醇胺浓度为10～100μmol/L，所述亚硒酸钠浓度为5～25ng/L，所述微量元素A浓度为0.1～1％，所述微量元素B浓度为0.1～1％，所述AHR抑制剂浓度为0.5～5μmol/L，所述去乙酰化酶抑制剂浓度为0.5～5μmol/L，所述Foxo1抑制剂浓度为6～100nmol/L。

2.如权利要求1所述的多能干细胞分化为自然杀伤细胞的培养液，其特征在于，所述微量元素A包含1.6mg/ml CuSO₄·5H₂O、863mg/ml ZnSO₄·7H₂O、17.3mg/ml Selenite·2Na和1155.1mg/ml Ferric citrate；

所述微量元素B包含0.17mg/ml MnSO₄·H₂O、140mg/ml Na₂SiO₃·9H₂O、1.24mg/mlMolydbic acid,ammonium salt、0.65mg/ml NH₄VO₃、0.13mg/ml NiSO₄·6H₂O和0.12mg/mlSnCl₂。