[发明专利]一种基于响应面法优化酶辅助提取的聚合草多糖及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种基于响应面法优化酶辅助提取的聚合草多糖的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

步骤一：提取

将聚合草粉末加水浸泡，同时加入1％的复合酶并调节PH值至6，浸泡后得到提取液，将所述提取液过滤，滤液浓缩，得浓缩液；其中，所述浸泡时间为60min，所述水与聚合草粉末的用量比为20mL/g；

步骤二：醇沉除杂

将上述所得浓缩液醇沉除去水溶性杂质后得到聚合草粗多糖沉淀；

步骤三：去蛋白

将上述所得聚合草粗多糖采用Sevag法去除蛋白；

步骤四：透析去盐

将上述去除蛋白后的聚合草粗多糖采用透析法去除无机盐和小分子物质，得去盐聚合草多糖；

步骤五：DEAE-52纤维素柱层析

将上述所得去盐聚合草多糖进行DEAE-52纤维素柱层析，收集并合并主峰的收集液，浓缩，冻干；

步骤六：Sepharose CL-6B琼脂糖凝胶柱层析

将上述所得冻干后的聚合草多糖进行Sepharose CL-6B琼脂糖凝胶柱层析，收集并合并主峰的洗脱液，浓缩，冻干后得到聚合草粗多糖。

2.根据权利要求1中所述的一种基于响应面法优化酶辅助提取的聚合草多糖的制备方法，其特征在于，步骤一中所述聚合草粉末通过以下方法得到：

取聚合草洗净，烘干后将其粉碎并过筛，得到聚合草粉末。

3.根据权利要求2中所述的一种基于响应面法优化酶辅助提取的聚合草多糖的制备方法，其特征在于，所述烘干温度为50℃。

4.根据权利要求2中所述的一种基于响应面法优化酶辅助提取的聚合草多糖的制备方法，其特征在于，所述过筛所用筛网尺寸为1mm。

5.根据权利要求1中所述的一种基于响应面法优化酶辅助提取的聚合草多糖的制备方法，其特征在于，步骤一中所述浸泡温度为50℃。

6.根据权利要求1中所述的一种基于响应面法优化酶辅助提取的聚合草多糖的制备方法，其特征在于，步骤一中所述的复合酶包括纤维素酶、果胶酶和木瓜蛋白酶。

7.根据权利要求6中所述的一种基于响应面法优化酶辅助提取的聚合草多糖的制备方法，其特征在于，所述纤维素酶、果胶酶和木瓜蛋白酶的质量比为1：1：1。

8.根据权利要求1中所述的一种基于响应面法优化酶辅助提取的聚合草多糖的制备方法，其特征在于，步骤二中所述醇沉除杂中所加入乙醇浓度为75-80％。

9.权利要求1中所述的制备方法制备得到的聚合草多糖。

10.权利要求9所述的聚合草多糖在鸡肠道内调控益生菌丰度的应用。