[发明专利]一种用于检测动物血清中GnRH抗体滴度的ELISA试剂盒有效
申请号: | 202110070639.7 | 申请日: | 2021-01-19 |
公开(公告)号: | CN112904024B | 公开(公告)日: | 2023-01-13 |
发明(设计)人: | 王弋;刘秋云;段巧梅;刘昕;韦炎冶;彭小珍;欧海航;覃柳斌 | 申请(专利权)人: | 东莞博盛生物科技有限公司;广州源博医药科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/76 | 分类号: | G01N33/76 |
代理公司: | 广州专理知识产权代理事务所(普通合伙) 44493 | 代理人: | 张凤 |
地址: | 523000 广东省东莞市松山湖高新*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 动物 血清 gnrh 抗体 elisa 试剂盒 | ||
本发明属于GnRH检测试剂盒的技术领域,具体涉及一种用于检测动物血清中GnRH抗体滴度的ELISA试剂盒,所述试剂盒包括预先包被和封闭的ELISA反应板,为以GnRH多肽作为包被抗原,还包括包被液和封闭液;所述GnRH多肽的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示;所述GnRH试剂盒还包括标准阴性血清、标准阳性血清、辣根过氧化酶HRP标记山羊抗猫IgG、洗涤液、稀释液、底物液以及终止液;采用GnRH多肽抗原作为包被抗原,采用了ELISA检测方法用以检测GnRH抗体滴度,从而了解动物该阶段的生殖能力,节约包被和封闭的时间,缩短了对GnRH的检测流程,能够稳定地检测动物血清中GnRH抗体滴度。
技术领域
本发明属于GnRH检测试剂盒的技术领域,具体涉及一种用于检测动物血清中GnRH抗体滴度的ELISA试剂盒。
背景技术
促性腺激素释放激素(GnRH)也被称为GnRH1、促黄体生成激素释放激素(LHRH)、促性腺素释放素原-1和促性腺素释放素原-1前体,是从垂体前叶释放的肽类激素,主要负责调节卵泡刺激激素(FSH)和促黄体生成激素(LH)的合成和释放。在雄性和雌性中,GnRH从下丘脑释放到血液中并通过血液移动到垂体,它在那里诱导促性腺激素分别诱导促黄体生成激素(LH)和促卵泡激素(FSH)的释放。在生长的雄性动物中,LH促进睾丸发育和睾丸甾类的合成。在生长的雌性动物中,FSH刺激卵巢发育和其中的卵泡发育、卵巢甾类的合成和排卵,从而保证了动物的生殖能力。故控制动物繁殖的一条途径可以通过免疫GnRH,诱导GnRH的抗体,体内中和GnRH法减少GnRH水平,导致LH和FSH合成减少,而伴随发情周期和精子生成的破坏,从而达到绝育的目的。因此通过检测动物血清GnRH抗体滴度可以了解动物体内相关的激素水平,结果直观反映动物的生殖能力,而此前未有相关技术用于检测GnRH抗体。
发明内容
针对上述问题,本发明的目的在于提供一种用于检测动物血清中GnRH抗体滴度的ELISA试剂盒,用于稳定检测动物血清中GnRH抗体滴度,缩短了现有技术对GnRH的检测流程。
本发明的技术内容如下:
本发明提供了一种用于检测动物血清中GnRH抗体滴度的ELISA试剂盒。
本发明还提供了一种用于检测动物血清中GnRH抗体滴度的ELISA试剂盒,所述试剂盒包括预先包被和封闭的ELISA反应板;
所述预先包被和封闭的ELISA反应板为以GnRH多肽作为包被抗原;
所述GnRH多肽的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示;
所述预先包被和封闭的ELISA反应板还包括包被液和封闭液,所述包被液为Na2CO3-NaHCO3缓冲液,其pH为9.1±0.2;
所述封闭液为10%~20%胎牛血清或1~10%羊血清;
所述检测动物血清中GnRH抗体滴度的试剂盒还包括标准阴性血清、标准阳性血清、辣根过氧化酶HRP标记山羊抗猫IgG、洗涤液、稀释液、底物液以及终止液;
所述洗涤液和稀释液均为TBST溶液,所述TBST溶液的配制为:
1)10×TBS缓冲液(pH7.6):称取Tris和NaCl,加水至终浓度为Tris 24.2g/L,NaCl80.0g/L,浓HCl调节pH值至7.6,即得,置于2~8℃保存,有效期12个月;
2)将10×TBS缓冲液(pH7.6)用水稀释成1×TBS,并添加0.05%Tween 20;
所述底物液包括TMB显色液,包括显色A液和B液,配比为1:1,使用前进行配制;
所述终止液为硫酸溶液,其浓度为0.55mol/L。
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