[发明专利]一个与黄瓜果实多心室性状紧密连锁的分子标记Indel-LNT-36有效
申请号: | 202110073448.6 | 申请日: | 2021-01-20 |
公开(公告)号: | CN113151532B | 公开(公告)日: | 2023-02-28 |
发明(设计)人: | 李季;王慧;田真;陈劲枫 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11;A01H1/04 |
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地址: | 210095 江苏省南京*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一个 黄瓜 果实 多心 性状 紧密 连锁 分子 标记 indel lnt 36 | ||
1.一种辅助鉴定华北型黄瓜CC3和西双版纳黄瓜SWCC8及其后代的果实心室数目等于3或者大于3的分子标记Indel-LNT-36,其特征在于:所述分子标记引物为下列引物对(5′→3′),
正向引物:5′-TGATCAGTGTTGATTCACAAA-3′,
反向引物:5′-TGAAACATCAGTAAAACGTCA-3′。
2.一种辅助鉴定华北型黄瓜CC3和西双版纳黄瓜SWCC8及其后代的果实心室数目等于3或者大于3的分子标记方法,其特征在于:以待鉴定黄瓜材料的DNA作为模板,用权利要求1所述的分子标记Indel-LNT-36的引物对进行PCR扩增;对扩增产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳分离分析,扩增出105bp特异性条带的黄瓜植株为具备果实心室数目大于3的植株,而扩增出128bp条带的黄瓜植株为果实心室数目等于3的植株。
3.根据权利要求2所述的分子标记方法,其特征在于,所述的分子标记方法包括:
(1)以待鉴定黄瓜材料的DNA为模板,用权利要求1所述的分子标记Indel-LNT-36的引物对进行PCR扩增;PCR扩增反应的总体系为10μL,包括:2×Taq Master Mix 5.0μL,ddH2O2.0μL,正、反向引物各1.0μL,DNA 1.0μL(50ng/μL);反应程序为94℃预变性5min;94℃变性30s,55℃退火30s,72℃延伸1min,26个循环;72℃终延伸10min,4℃保存,PCR产物检测:PCR产物在7%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,硝酸银染色;
(2)标记引物Indel-LNT-36鉴定:果实心室数目大于3的植株能扩增出105bp的特异性条带,果实心室数目等于3的植株扩增出128bp的特异性条带。
4.权利要求1所述的分子标记在华北型黄瓜CC3和西双版纳黄瓜SWCC8果实心室数量性状的分子标记辅助选择育种中的应用。
5.权利要求1所述的分子标记在华北型黄瓜CC3和西双版纳黄瓜SWCC8及其后代果实心室数量性状鉴定中的应用。
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