[发明专利]一种高大毛壳菌在硝化纤维素的脱硝上的应用

权利要求书

1.一种高大毛壳菌在硝化纤维素脱硝上的应用，其特征在于，所述高大毛壳菌(Chaetomium elatum)的保藏编号为CGMCC NO.3.5617。

2.根据权利要求1所述的高大毛壳菌在硝化纤维素脱硝上的应用，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1，菌株的培养及孢子悬浮液的配置

将高大毛壳菌株在马铃薯琼脂培养基上活化以后，用接种环取一环孢子，接入1 mL的无菌水中配置成孢子悬浮液，再将200 µL孢子悬浮液加入100 mL液体马铃薯培养基中培养；

步骤2，底物的转化

待菌株培养至出现大量菌丝球体，培养液颜色产生红色时，加入硝化棉使其终浓度为4g/L，进行培养转化；

步骤3，底物的重提取

将培养转化完成后，对培养液进行抽滤，用有机溶液对硝化棉实现重提取。

3.根据权利要求2所述的高大毛壳菌在硝化纤维素的脱硝上的应用，其特征在于，步骤1中马铃薯培养基的成分为葡萄糖 20.0, 单位g/L；马铃薯浸出液1000 mL。

4.根据权利要求3所述的高大毛壳菌在硝化纤维素的脱硝上的应用，其特征在于，所述马铃薯浸出液由200 g马铃薯，加入1000 mL蒸馏水煮沸，过滤取滤液，用蒸馏水补至1000mL。

5.根据权利要求2所述的高大毛壳菌在硝化纤维素的脱硝上的应用，其特征在于，步骤2的转化具体如下所示：①称取0.2g的硝化棉，加入10mL的无菌去离子水中；②将浸入水后的硝化棉在115℃下高温高压蒸汽灭菌20min得无菌的硝化棉溶液，由于硝化棉不溶于水，在无菌的条件下进行烘干，得到无菌的0.2g硝化棉；③将无菌的0.2g硝化棉加入出现大量菌丝球体且变红的培养液中，使得硝化棉终浓度为4g/L进行培养转化。

6.根据权利要求2所述的高大毛壳菌在硝化纤维素的脱硝上的应用，其特征在于，步骤3中抽滤结束后，取滤纸上的沉淀；用超纯水与1 M NacL溶液依次对沉淀进行洗涤，重复洗涤三次；洗涤完成后抽滤取沉淀；按照1g沉淀中加入40ml丙酮的剂量，向沉淀中加入丙酮溶液，40℃溶解2 h，离心取上清；再向上清中逐渐滴加水与乙醇按体积比为2:1混合的溶液，直至硝化纤维素不再析出；将析出的硝化纤维素烘干，称重，计算损失率，按照每100mL培养液中重提取烘干后的硝化棉/0.2进行计算；将析出的硝化纤维素烘干，使用仪器型号为Elemantar:Vario EL Cube 的元素分析仪进行N含量的分析。

7.根据权利要求2所述的高大毛壳菌在硝化纤维素的脱硝上的应用，其特征在于，所述步骤2中培养及转化的温度为28℃，体系中pH为7.0-7.5。