[发明专利]一种外磁场操控的免疫荧光机器人的制备方法及其应用

说明书

本发明属于生物材料领域，具体公开了一种外磁场操控的免疫荧光机器人的制备方法及其应用，包括以下步骤S1：将一定量的柠檬酸铁放置于乙二醇与二乙二醇的混合溶液中，通过超声搅拌至透明粘稠状黄色溶液；S2：在N2保护下加入一定量的聚乙烯吡咯烷酮，采用机械搅拌，并在110‑130℃下反应0.5‑3h，得黄棕色透明溶液；S3：加入一定量的NaAc，通过机械搅拌使NaAc全部溶解，搅拌30‑60min后，转入聚四氟反应釜中，继续反应，得到产物；S4：用超纯水和无水乙醇交替洗涤产物三次，磁分离纯化后，用超纯水定容到50mL，得羧基化Fe₃O₄纳米团簇分散液；本发明采用柠檬酸铁作为原材料制备出羧基化的Fe₃O₄纳米颗粒分散液，不仅磁分选效果好，并且还是带羧基的分散性良好的磁性纳米材料。

技术领域

本发明涉及生物材料领域，具体为一种外磁场操控的免疫荧光机器人的制备方法及其应用。

背景技术

根据世界卫生组织的报告，癌症已经成为人类的头号杀手，而乳腺癌是女性中最常见的恶性肿瘤，是全球最常见的三大癌症之一。2021年，全世界将近1700万人被诊断为乳腺癌，且约有50万人死于这种疾病。随着科技的发展，免疫细胞治疗越来越多，然而，如何能使更多的免疫细胞浸润到肿瘤细胞中，仍然是一个技术难题。

纳米磁性材料(Fe₃O₄)是指磁性的微小颗粒，其直径再1-100nm，属于典型的等离子替纳米颗粒。在众多的无机纳米颗粒中，磁性纳米颗粒脱颖而出，因为其优于其他材料的一些特点在生物医药领域应用广泛：(I)Fe₃O₄纳米颗粒的合成方法简单高效，可大量合成不同形状、不同粒径、不同官能团修饰的Fe₃O₄纳米颗粒；(II)Fe₃O₄纳米颗粒的形状、粒径、表面化学易于调控，以最大程度地提高目标细胞对Fe₃O₄纳米颗粒的内吞率；(III)Fe₃O₄纳米颗粒易于外磁场操控，可在外磁场的控制下，实现时空可控，让Fe₃O₄纳米颗粒到达目标位置。基于以上优势，Fe₃O₄纳米颗粒在生物成像、药物负载、肿瘤治疗等领域得到广泛关注。

发明内容

本发明的目的在于提供一种外磁场操控的免疫荧光机器人的制备及其应用，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种外磁场操控的免疫荧光机器人的制备方法，包括以下步骤：

S1：将一定量的柠檬酸铁放置于乙二醇与二乙二醇的混合溶液中，通过超声搅拌至透明粘稠状黄色溶液；

S2：在N₂保护下加入一定量的聚乙烯吡咯烷酮(PVP)，采用机械搅拌，并在110-130℃下反应0.5-3h，得黄棕色透明溶液；

S3：加入一定量的NaAc，通过机械搅拌使NaAc全部溶解，搅拌30-60min后，转入聚四氟反应釜中，继续反应，得到产物；

S4：用超纯水和无水乙醇交替洗涤产物三次，磁分离纯化后，用超纯水定容到50mL，得羧基化Fe₃O₄纳米团簇分散液；

S5：移取一定量由S4步骤中得到的羧基化Fe₃O₄纳米团簇分散液，按体积比为1：0.1-1与近红外荧光溶液混合，避光，并放置于37℃摇床中，反应12-24h；

S6：用超滤管超滤，弃掉未负载上去的近红外荧光分子，收集样品，放于4℃条件下保存；