[发明专利]一种利福平耐药结核病分子标志物、检测试剂及其应用

说明书

本发明提供了一种利福平耐药结核病分子标志物、检测试剂及其应用。涉及生物医学技术领域。所述分子标志物包括TRIM9、TRIM21和TRIM56基因及其表达产物；所述TRIM9、TRIM21和TRIM56基因在利福平耐药结核病患者中表达下调。本发明可以更快速、高效、敏感地鉴别利福平耐药结核病患者，可用于利福平耐药结核病的筛查。

技术领域

本发明涉及技术领域，尤其是涉及一种利福平耐药结核病分子标志物、检测试剂及其应用。

背景技术

结核病(tuberculosis，TB)是由结核杆菌感染引起的慢性传染病，是全球十大死因之一。据世界卫生组织(World Health Organization,WHO)估算，2019年全球新发结核病患者约996万，近几年基本维持在同一水平。2019年全球新发的结核病患者中，约有3.3％的新患者和18％的复治患者对利福平耐药。估算全球利福平耐药结核病(rifampicin-resistant tuberculosis，RR-TB)患者数约46.5万，其中耐多药结核病(multi-drugresistant tuberculosis,MDR-TB)约占78％。MDR/RR-TB患者的最新的治疗结局数据显示，全球MDR/RR-TB患者治疗成功率为57％。利福平耐药结核病是全球结核病控制的重要挑战，利福平耐药结核病患者的早期诊断以及合理治疗对于减少结核病传播至关重要。

目前，基于表型培养的方法仍然是药物敏感性测试的主要手段，但耗时较长，并且需要严格的微生物学安全预防措施。尽管Xpert MTB/RIF或线性探针等分子技术快速高效，但仍存在一定的假阳性率和假阴性率，且费用高，在基层单位尚未普及。因此，迫切需要开发出新的诊断标志物，建立快速、高效、敏感、经济的诊断方法。

宿主的天然免疫应答反应对结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)感染的进展和控制至关重要。据报道，利福平耐药菌株和敏感菌株感染机体后可引发不同的免疫反应。因此，寻找具有调控天然免疫应答作用的调节因子，有利于该病的早期诊断和寻找新的治疗靶点。

基于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种利福平耐药结核病分子标志物、检测试剂及其应用，本发明可以更快速、高效、敏感地鉴别利福平耐药结核病患者，可用于利福平耐药结核病的筛查。

为了实现上述目的，本发明采取的技术方案为：

一种利福平耐药结核病分子标志物，所述分子标志物包括TRIM9、TRIM21和TRIM56基因及其表达产物；所述TRIM9、TRIM21和TRIM56基因在利福平耐药结核病患者中表达下调。

本发明从70多个不同成员的TRIM蛋白家族中，找到3个利福平耐药结核病的主要检测靶点：TRIM9、TRIM21和TRIM56基因。

在一个实施方案中，所述分子标志物指的是TRIM9、TRIM21和TRIM56基因的mRNA或所表达的蛋白质。

前述利福平耐药结核病分子标志物在制备诊断和/或筛查利福平耐药结核病的试剂中的应用。

检测试剂在制备诊断和/或筛查利福平耐药结核病的产品中的应用，所述检测试剂用于检测TRIM9、TRIM21和TRIM56基因及其表达产物。

在一个实施方案中，所述产品包括通过RT-PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交、芯片或高通量测序平台检测TRIM9、TRIM21和TRIM56基因的产品。

在一个实施方案中，所述检测试剂能够定量检测样品中TRIM9、TRIM21和TRIM56基因的表达量；

优选地，所述检测试剂包含PCR扩增引物、探针、基因芯片中的一种或多种；