[发明专利]一株耐酸的小白链霉菌及其在ε-聚赖氨酸发酵中的应用

权利要求书

1.一株小白链霉菌(Streptomyces albulus)2019029，该菌株于2020年10月12日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No.20880。

2.权利要求1所述小白链霉菌2019029在生产ε-聚赖氨酸中的应用。

3.权利要求1所述小白链霉菌2019029发酵合成ε-聚赖氨酸的方法，其特征在于，包括如下步骤：

将活化的小白链霉菌2019029接种到种子培养基制备种子液；将种子液接种到发酵培养基中发酵培养合成ε-聚赖氨酸；

或者将活化的小白链霉菌2019029接种发酵培养基中发酵培养合成ε-聚赖氨酸；

所述发酵培养基是以葡萄糖、蔗糖、甘油、木糖、半乳糖、果糖、甘露醇、肌醇、麦芽糖、糊精、山梨醇或棉籽糖中的一种或多种组合为碳源；

所述发酵培养基中，有机氮源包括酵母粉、牛肉膏、鱼粉、蛋白胨、玉米浆、尿素、豆粕粉、花生饼粉、棉籽蛋白或菌体蛋白的一种或多种组合；无机氮源包括硫酸铵、硝酸铵或氯化铵的一种或多种组合。

4.如权利要求3所述方法，其特征在于，所述方法中，将活化的小白链霉菌2019029接种种子培养基，种子培养基中孢子的起始浓度为1×10⁵～1×10⁸个/mL；

种子液的培养条件为28～35℃振荡培养1-2天；

种子液按质量百分数计以5-20％的接种量接种到发酵培养基。

5.如权利要求3所述方法，其特征在于，所述方法中，将活化的小白链霉菌2019029接种发酵培养基，发酵培养基中孢子的起始浓度为1×10⁵～1×10⁸个/mL。

6.如权利要求4-5任一项所述方法，其特征在于，发酵培养的条件为28～35℃，通气量0.5-2vvm，发酵过程中维持pH为3.5～4.5，发酵24～192h。

7.如权利要求6所述方法，其特征在于，所述种子培养基或发酵培养基为M3G液体培养基：M3G液体培养基，每升组分含量包括如下：葡萄糖50g，酵母粉5g，(NH₄)₂SO₄ 10g，KH₂PO₄·2H₂O 1.4g，MgSO₄·7H₂O 0.5g，K₂HPO₄·2H₂O 0.8g，FeSO₄·7H₂O 0.03g和ZnSO₄·7H₂O0.03g，余量为水。

8.如权利要求6所述方法，其特征在于，当发酵培养基中pH值下降到3.5～4.5时，通过添加碱溶液维持pH稳定，直到发酵结束。

9.如权利要求6所述方法，其特征在于，当发酵培养基中pH值下降到5.0～6.0时，通过添加碱溶液维持pH稳定直到菌体干重倍增，然后使pH下降到2.5-3.0，并维持6-48h，随后添加碱溶液将pH调为3.5～4.5，直到发酵结束。

10.如权利要求8所述方法，其特征在于，所述碱溶液为NaOH溶液、液氨或氨水。

11.如权利要求3-5任一项所述方法，其特征在于，所述的发酵培养是分批发酵或补料-分批发酵。

12.如权利要求11所述方法，其特征在于，所述的补料-分批发酵包括流加碳源或氮源中的一种或多种组合。