[发明专利]一种长山药复壮种苗制备方法

权利要求书

1.一种山药复壮种苗制备方法，其特征是应用植物组织培养技术使脱除病毒的山药微茎尖生长成苗后，通过继代培养使基数增大并在试管内生产微型零余子，收获后的零余子经过物理和化学方法复合处理后破除休眠，栽种到试管外的基质中发芽并生长成苗；

收获后的零余子经过物理和化学方法复合处理后破除休眠是指来自于试管苗的微型零余子，与山药块茎相同也存在休眠现象，不经过休眠或休眠期不足的零余子，种在地下虽然可以发根，但不能萌芽，因此很难长出新的山药植株，需要用物理或化学方法进行处理破除休眠，促使其发芽，具体是将试管内收获的微型零余子浸泡于以下溶液中：GA3(赤霉素)100mg/L+BA(6-苄氨基嘌呤)10mg/L+sillwet77 0.02％，放入抽滤器中抽滤三分钟，然后从抽滤器中取出并于室温下放置2小时，最后将零余子室温下自然阴干，装入玻璃瓶中于4度的低温下储存2个月。

2.如权利要求1所述的山药复壮种苗制备方法，其特征是植物组织培养技术是指山药原种质通过常规的无菌操作进行试管内的病毒脱除和繁殖，其基本方法是将生发于山药的芦头、块茎截断或零余子的茎段进行表面消毒灭菌后，接种于无菌培养基中进行初代培养和继代繁殖，生根的试管苗过渡移栽到温室/网室内的蛭石基质中，保持湿度并定期施加营养液，当苗长到20公分以上移栽至大田中常规管理；或在试管内产生零余子，将收获的零余子破除休眠后，生发成苗培育生长。

3.如权利要求1或2所述的山药复壮种苗制备方法，其特征是试管内生产微型零余子是指将山药蔓茎的茎段经过表面消毒灭菌后，切成单芽插入初代培养基：MS+BA(6-苄氨基嘌呤)0.5mg/L+NAA(a-萘乙酸)0.1mg/L+琼脂7g/L，用稀盐酸或氢氧化钠溶液调节pH值至5.8，待苗长至五片叶后切成单芽接入继代培养基：MS+KT(激动素)2mg/L+NAA(a-萘乙酸)0.01mg/L+活性炭0.5g/L+琼脂7g/L，用稀盐酸或氢氧化钠溶液调节pH值至5.8，

培养四周可生根7条左右，苗高7公分左右，生产直径大于5mm的零余子2-4个；收获零余子后将试管苗继续进行继代培养，如此不断生产零余子。

4.如权利要求1或2所述的山药复壮种苗制备方法，其特征是所述继代培养是指长山药试管苗在生长为至少三节以上时，将其剪切为单节的切段，插入无菌培养基中进行培养，这些单节的茎段由腋芽生长为植株的茎叶部分，茎段下部生根生长成试管苗，如此反复不断扩大试管苗的数量。

5.如权利要求1或2所述的山药复壮种苗制备方法，其特征是所述试管外的基质是指长山药试管苗过渡移栽至试管外所用的基质，本方法所用的基质为草炭、蛭石和珍珠岩的混合物，其比例为3:1:1。