[发明专利]一种促凝血桃花有效成分及其提取分离方法和应用

权利要求书

1.一种促凝血桃花有效成分的提取分离方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）以干燥、粉粹后的桃花为原料，用石油醚浸提，石油醚浸提结束后过滤，回收滤渣，然后用乙醇室温浸提，乙醇浸提结束后，过滤、浓缩，得乙醇总浸膏；将乙醇总浸膏分散于少量水中形成分散液，依次用溶剂石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，回收溶剂，得到石油醚部位、乙酸乙酯部位及正丁醇部位；

2）将步骤1）所得正丁醇部位采用硅胶柱色谱分离，用二氯甲烷-甲醇进行梯度洗脱，以硅胶薄层色谱检测合并，得到8个组分，按照所得组分极性由小到大依次标记为组分1~8；

3）将步骤2）所得组分4，经硅胶柱色谱分离，以二氯甲烷-甲醇进行梯度洗脱，经硅胶薄层色谱检测，合并相同组分并减压回收溶剂，得到3个亚组分，按照所得组分极性由小到大依次标记为Fr.4.1、Fr.4.2、Fr.4.3；Fr.4.3先经硅胶柱色谱分离，然后用Sephadex LH-20凝胶柱色谱纯化，薄层色谱检测、合并相同组分并减压浓缩回收溶剂、干燥，得到化合物1；

4）将步骤2）所得组分7，经硅胶柱色谱分离，以二氯甲烷-甲醇进行梯度洗脱，经硅胶薄层色谱检测，合并相同组分并减压回收溶剂，得到4个亚组分，按照所得组分极性由小到大依次标记为Fr.7.1、Fr.7.2、Fr.7.3、Fr.7.4；Fr.7.2经Sephadex LH-20凝胶柱色谱纯化，薄层色谱检测、合并相同组分并减压浓缩回收溶剂、干燥，得到化合物2；

化合物1和/或2即为促凝血桃花有效成分；

化合物1、2的结构如下所示：

；

步骤2）中，硅胶柱色谱分离时，用体积比100:0、100:1、100:2、100:4、100:8、100:16、100:32、0:100的二氯甲烷-甲醇进行梯度洗脱；

步骤3）中，硅胶柱色谱分离时，用体积比20:1~2:1的二氯甲烷-甲醇进行梯度洗脱；Sephadex LH-20凝胶柱色谱纯化时，以甲醇为洗脱液；

步骤4）中，硅胶柱色谱分离时，用体积比15:1~1:1的二氯甲烷-甲醇进行梯度洗脱；Sephadex LH-20凝胶柱色谱纯化时，以体积比1:1的二氯甲烷-甲醇为洗脱液。

2.根据权利要求1所述促凝血桃花有效成分的提取分离方法，其特征在于，步骤1）中，干燥、粉粹后的桃花在室温下用石油醚浸提2~4次，每次3~4 d。

3.根据权利要求1所述促凝血桃花有效成分的提取分离方法，其特征在于，步骤1）中，用体积浓度70~80%的乙醇在室温下浸提滤渣，浸提2~4次，每次3~4 d，乙醇浸提结束后合并乙醇浸提液，过滤、浓缩，得乙醇总浸膏。