[发明专利]一种检测玉米赤霉烯酮的比率型电化学传感器制备方法

说明书

本发明涉及了一种基于抗体/适体双识别元件检测玉米赤霉烯酮的比率型电化学传感器制备方法，包括以下步骤：采用硼族金属超薄纳米片/金属八面体@双金属纳米复合材料修饰金电极，滴加抗体与适体互补链，最终得到抗体/核酸适配体互补链/硼族金属超薄纳米片/金属八面体@双金属纳米复合材料/金电极，在电极表面滴加不同浓度的目标物ZEN和Mg²⁺溶液，以抗体/核酸适配体互补链/硼族金属超薄纳米片/金属八面体@双金属纳米复合材料/金电极为工作电极，以铂丝电极为对电极，饱和氯化银为参比电极，通过DNA‑13'端所带信号分子响应信号的降低和与酶剪切后链互补的连接DNA‑3的信号标签对H₂O₂还原响应信号的增加来指示样品中ZEN的含量，得到了用于检测ZEN的比率型电化学传感器。同其它用于玉米赤霉烯酮含量检测的电化学传感器相比，所制备的新型双识别元件比率型电化学适体传感器具有灵敏度高、重复性好、准确度高的优点。

技术领域

本发明涉及一种基于抗体/适体双识别元件检测玉米赤霉烯酮的比率型电化学传感器制备方法，尤其涉及一种基于硼族金属超薄纳米片/金属八面体@双金属纳米复合材料的制备方法。

背景技术

我国是粮食生产和消费大国，其粮食安全问题关系国计民生。然而近年来，国内的粮食安全形势变得越加严峻，关于陈化粮、霉变谷物中的真菌毒素污染事件不容乐观。其中，玉米赤霉烯酮（ZEN）因其具备高稳定和强毒的特性被列为危害最严重的真菌毒素之一。ZEN 是一种由镰刀菌（即禾谷镰刀菌、秆镰刀菌和谷类镰刀菌等）产生的非甾体雌激素型真菌毒素，广泛存在于各种谷物中，包括玉米、小麦和水稻等。作为一种具有免疫毒性、神经毒性和致癌性的真菌毒素，ZEN 不仅会污染作物造成畜牧业巨大的经济损失，还可以通过食物链进入人体和动物体内，造成重大的健康威胁。当前 ZEN 的检测方法主要是色谱技术，这些色谱技术的检测结果准确、可靠，然而它们通常需要大型设备、价格昂贵且操作繁琐。为了食品安全和畜牧业的持续发展，寻求一种更加灵敏、快速和便捷的分析方法来监测食品中对人体健康造成威胁的ZEN具有非常关键的意义。

发明内容

发明本发明涉及一种基于抗体/适体双识别元件检测玉米赤霉烯酮的比率型电化学传感器制备方法。

一种基于抗体/适体双识别元件检测玉米赤霉烯酮的比率型电化学传感器制备方法，其步骤如下：

所述的金属八面体@双金属纳米复合材料的制备：利用水热合成法制备金属八面体，称取1.0~3.0 g金属氯化物A和0.1~0.5 g氨基官能化试剂溶解在10~20 mL的分散剂中，并通过超声处理10-30分钟。将所得混合物转移至水热反应容器中，在100~500 ℃的烘箱内温育24~48小时。将获得的产物以8000~10000 rpm（5-10 min）离心并用分散剂洗涤2~5次，在50~100 ℃下干燥以获得金属八面体。然后取1.0~5.0 mg金属八面体和1.0~5.0 mg交联剂溶解在1~5 mL 1~5％有机酸溶液中。然后，将溶液在超声仪中超声处理5~20分钟。之后将100~200 μL 金属硝酸盐溶液（3.0~6.0 mM）和200~600 μL贵金属溶液（3.0~8.0 mM）添加到上述混合物中，并使用涡旋混合器混合。在50~100 ℃温育5~10 h后，在8000~12000 rpm转速下离心10~15 min 2~3次，即可收集金属八面体@双金属纳米复合材料；