[发明专利]一种PBMC和MSC共培养的方法及其应用在审
| 申请号： | 202110086256.9 | 申请日： | 2021-01-22 |
| 公开（公告）号： | CN112725267A | 公开（公告）日： | 2021-04-30 |
| 发明（设计）人： | 朱灏 | 申请（专利权）人： | 华夏源细胞工程集团股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775;C12N5/078;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 上海微策知识产权代理事务所(普通合伙) 31333 | 代理人： | 张静 |
| 地址： | 201100 上海市闵行*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 pbmc msc 培养 方法 及其 应用 | ||
1.一种PBMC和MSC共培养的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
S1，MSC的接种；
S2，MSC的去增值处理；
S3，冻存PBMC的复苏；
S4，PBMC的染色；
S5，PBMC和MSC共培养。
2.根据权利要求1所述的PBMC和MSC共培养的方法，其特征在于，步骤S1中，在对MSC接种前还包括调整细胞悬液的浓度。
3.根据权利要求2所述的PBMC和MSC共培养的方法，其特征在于，所述细胞悬液调整后的浓度为1×105/ml～3×105/ml。
4.根据权利要求1所述的PBMC和MSC共培养的方法，其特征在于，步骤S2中，在对MSC去增值处理时包括加入一定量的抑制剂。
5.根据权利要求4所述的PBMC和MSC共培养的方法，其特征在于，所述抑制剂的浓度为8～10μg/ml。
6.根据权利要求1所述的PBMC和MSC共培养的方法，其特征在于，在步骤S4中，所述PBMC的染色过程包括调整PBMC细胞悬液浓度、染色、终止染色、离心。
7.根据权利要求1所述的PBMC和MSC共培养的方法，其特征在于，步骤S5中，在PBMC和MSC共培养时，PBMC和MSC的体积比为5～10：1。
8.根据权利要求7所述的PBMC和MSC共培养的方法，其特征在于，在PBMC和MSC共培养时，还包括加入一定浓度的刺激剂。
9.根据权利要求8所述的PBMC和MSC共培养的方法，其特征在于，所述刺激剂为anti-CD3、anti-CD28中的至少一种。
10.一种根据权利要求1-9任一项所述的PBMC和MSC共培养的方法的应用，其特征在于，所述共培养的方法可用于间充质干细胞体外抑制淋巴细胞增殖抑制率的检测方法中。
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