[发明专利]一种重组菌株及制备天麻苷元的方法有效
| 申请号： | 202110087348.9 | 申请日： | 2021-01-22 |
| 公开（公告）号： | CN112852697B | 公开（公告）日： | 2023-02-10 |
| 发明（设计）人： | 徐德宏;谭朝阳;崔培梧;罗月芳;江灵敏;罗怀浩 | 申请（专利权）人： | 湖南中医药大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12N15/53;C12N15/60;C12P7/22;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京润平知识产权代理有限公司 11283 | 代理人： | 黄志兴 |
| 地址： | 410208 湖南省长沙*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 重组 菌株 制备 天麻 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种制备天麻苷元的方法，其特征在于，该方法包括：将酪氨酸裂解酶基因和4-羟基甲苯甲基羟化酶基因依次导入大肠杆菌出发菌株中得到重组菌株，将所述重组菌株进行诱导培养后，接种至含有酪氨酸的培养基中进行转化培养，以转化所述酪氨酸为天麻苷元；
其中，所述酪氨酸裂解酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，所述4-羟基甲苯甲基羟化酶基因含有pchF基因和pchC基因，所述pchF基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示，所述pchC基因的核苷酸序列如SEQ IDNO:3所示；所述含有酪氨酸的培养基中酪氨酸的含量为0.01-0.05wt％，所述转化培养至少满足以下条件：接种量为10-30g/L、转化温度为25-40℃、转化速度为200-300rpm、转化时间为3-12h。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述重组菌株的出发菌株为大肠杆菌BL21(DE3)。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述重组菌株含有表达载体，所述表达载体为pcdfDUET-1。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述诱导培养的诱导剂含有异丙基-β-D-硫代半乳糖苷。
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