[发明专利]一种小菌素MccY及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了一种小菌素MccY及其制备方法与应用，该小菌素MccY的氨基酸序列为GGRGHIAEYFSGPITQVSFYG。相较于MccJ25仅对肠炎等小部分血清型沙门菌有杀菌活性，该小菌素MccY对鸡白痢沙门菌、鼠伤寒沙门菌、肯塔基沙门菌、婴儿沙门菌、伦敦沙门菌、宋内志贺氏菌具有抑菌/杀菌作用，可杀灭MccJ25不能杀灭的其他沙门菌血清型，尤其是对畜禽生产中常见的鼠伤寒沙门菌、鸡白痢沙门菌具有显著杀菌效果，同时，对宋内志贺氏菌也有抑菌/杀菌作用，克服了小菌素窄谱性的短板，具有突破性的意义，具有作为抗生素替代物的潜力。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种小菌素MccY及其制备方法与应用。

背景技术

小菌素(Microcin，Mcc)是由肠道菌分泌的一类小分子抑菌肽，分子量约10kDa，由细菌的质粒或染色体相关基因簇编码，该基因簇部分基因相对保守，至少有4个基因参与编码小菌素:前体基因、转录后修饰基因、分泌基因、自身免疫基因。其结构基因主要编码小菌素前体，是小菌素主要结构成分；修饰基因能对小菌素前体进行加工，使其更易被相应受体识别，同时更好地发挥小菌素生物学活性；分泌基因编码分泌相关蛋白；免疫基因可以保护细菌不受自身分泌小菌素毒害。小菌素主要分两类I型、II型，其中I型小菌素由质粒编码，而II型小菌素主要由染色体编码。

目前已发现的小菌素有15种，它们的抑菌机制存在着一定的差异。其中研究较多的小菌素MccJ25的主要局限是抑菌谱较窄，仅对肠道菌属属中亲缘较近的菌种发挥抑菌、杀菌效应。例如MccJ25对肠炎沙门菌(Salmonella entertidis)的杀菌效果显著高于对大肠杆菌的杀菌效果，而对于鼠伤寒、鸡白痢等其他常见的肠炎亚科的血清型无杀菌效果，其原因是MccJ25作用于沙门菌的铁载体受体是FhuA，而该受体在鸡白痢沙门菌中的表达被提前终止了。因此，对于鸡白痢沙门菌(Salmonella Pullorum)、鼠伤寒沙门菌(Salmonellatyphimurium)、肯塔基沙门菌(Salmonella kentucky)、婴儿沙门菌(SalmonellaInfantis)、伦敦沙门菌(Salmonella London)、宋内志贺氏菌(Shigella sonnei)等常见的条件致病菌而言，仅使用MccJ25来抑菌显然不够广谱。

发明内容

为了克服现有小菌素抑菌谱较窄的不足，本发明的第一个方面的目的，在于提供一种小菌素MccY。

本发明的第二个方面的目的，在于提供一种编码小菌素MccY的多核苷酸。

本发明的第三个方面的目的，在于提供一种质粒。

本发明的第四个方面的目的，在于提供一种工程菌。

本发明的第五个方面的目的，在于提供一种小菌素MccY的制备方法。

本发明的第六个方面的目的，在于提供上述小菌素MccY和/或工程菌在抑菌剂和/或饲料中的应用。

本发明的第七个方面的目的，在于提供一种制剂。

为了实现上述目的，本发明所采取的技术方案是：

本发明的第一个方面，提供一种小菌素MccY，所述小菌素MccY的氨基酸序列为：

a)GGRGHIAEYFSGPITQVSFYG(SEQ ID NO.1)；或

b)SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列经过一个或多个氨基酸残基的取代、缺失或添加修饰后且具有所述小菌素MccY功能的序列。

本发明的第二个方面，提供一种多核苷酸，包含编码第一个方面的小菌素MccY的多核苷酸。

优选的，所述多核苷酸包含mcyA(SEQ ID NO.2)、mcyB(SEQ ID NO.3)、mcyC(SEQID NO.4)、mcyD(SEQ ID NO.5)。