[发明专利]一种糖响应的功能化纳米复合胶束的制备及在胰岛素递送中的应用

权利要求书

1.一种糖响应的功能化纳米复合胶束的制备方法，其特征在于步骤如下：

1)PCL-b-PEG的合成；

聚乙二醇PEG-OH与ε-己内酯ε-CL以1:100的摩尔比溶解在重蒸甲苯中，先经过液氮冷冻-抽真空-解冻过程，重复；在108-112℃条件下反应12h，通过冰乙醚沉淀和真空干燥得到PCL-b-PEG白色粉末；

2)PCL-NHBoc的合成；

N-(叔丁氧羰基)乙醇胺和ε-CL以1:100的摩尔比溶解在重蒸甲苯中，随后加入一滴Sn(Oct)₂，冻抽3次之后，放入108-112℃油浴中反应12h，冰乙醚沉淀和真空干燥后得到白色固体PCL-NHBoc；

3)PCL-NH₂的合成；

将PCL-NHBoc溶于三氟乙酸中，室温下搅拌2h，冰乙醚沉淀和真空干燥得白色固体，将白色固体溶解在体积比为1：1的三乙胺和二氯甲烷的混合溶剂中室温搅拌12h，冰乙醚沉淀和真空干燥得到PCL-NH₂；

4)BLA-NCA的合成；

称取L-天冬氨酸苄酯在重蒸的四氢呋喃中溶解分散，缓慢升温至60℃，称取三光气加入反应瓶中，其中摩尔体积比L-天冬氨酸苄酯：三光气：四氢呋喃＝3mmol：1mmol：12ml，观察到反应液由浑浊变为澄清亮黄色，充氮气除去瓶内过量的光气和氯化氢气体，旋蒸浓缩反应液，正己烷中沉淀抽滤，将抽滤得到的粗产物在乙酸乙酯/正己烷体积比为1:1的混合液中重结晶，抽滤干燥得到BLA-NCA；

5)PCL-b-PAsp(OBzl)的合成；

将PCL-NH₂和BLA-NCA以1:50的摩尔比用重蒸二氯甲烷溶解，冻抽3次，在氮气保护下，于30℃的油浴中反应，冰乙醚沉淀和真空干燥后得到白色固体PCL-b-PAsp(OBzl)；

6)PCL-b-PAsp的合成；

PCL-b-PAsp(OBzl)溶解于三氟乙酸中，依次加入苯甲醚和三氟甲磺酸，其中摩尔体积比PCL-b-PAsp(OBzl)：三氟乙酸：苯甲醚：三氟甲磺酸＝0.01mmol：10ml：1ml：1ml，在冰浴下搅拌1h，冰乙醚沉淀和真空干燥得到嵌段共聚物PCL-b-PAsp；

7)PCL-b-P(Asp-co-AspPBA)的合成；

PCL-b-PAsp溶于减蒸DMF中，先加入NHS在室温下搅拌1h，依次加入EDC，溶于DMF的氨基苯硼酸PBA，其中摩尔比PCL-b-PAsp：NHS：EDC：PBA＝0.01mmol：2.5mmol：1.5mmol：2.5mmol，室温搅拌12h，放入透析袋透析3天，冷冻干燥溶液得到黄色固体PCL-b-P(Asp-co-AspPBA)；

8)PCL-b-P(Asp-co-AspNTA)的合成；

PCL-b-PAsp溶于减蒸DMF中，先加入NHS在室温下搅拌1h，依次加入EDC，溶于DMF的氨三乙酸要缓慢滴加，其中摩尔比PCL-b-PAsp：NHS：EDC：NTA＝0.01mmol：2.5mmol：1.5mmol：2.5mmol，室温搅拌12h，放入透析袋透析3天，冷冻干燥溶液得到白色固体PCL-b-P(Asp-co-AspNTA)；

9)复合胶束的制备；

根据PCL-b-P(Asp-co-AspPBA)在胶束中所占质量比分别按照10％、25％和50％制备得到不同组成的复合胶束，将步骤1)得到的PCL-b-PEG，步骤7)得到的PCL-b-P(Asp-co-AspPBA)和步骤8)得到的PCL-b-P(Asp-co-AspNTA)溶解在DMSO中，在剧烈搅拌下快速加入pH为11.0的碱性水到聚合物溶液中，搅拌过夜，转入透析袋中在pH 7.4的缓冲液中透析1天，然后胶束中再添加醋酸锌溶液，室温搅拌4h，转入透析袋中再透析3天，得到螯合了锌离子的复合胶束，最后通过称量将溶液定容。

2.权利要求1所述方法制备的糖响应的功能化纳米复合胶束。

3.权利要求1所述方法制备的糖响应的功能化纳米复合胶束在制备胰岛素的递送体系中的应用。

4.根据权利要求3的应用，其特征在于，包括胰岛素的负载；

先配制新鲜的0.4mg/mL胰岛素溶液，然后将胰岛素溶液滴入权利要求1所述的复合胶束溶液中，搅拌24h，然后在PBS7.4中透析3天去除游离胰岛素，得到胰岛素的递送体系即负载胰岛素的纳米复合胶束。