[发明专利]一种高速逆流色谱法从牛樟芝发酵物中分离安卓奎诺尔的方法

权利要求书

1.一种高速逆流色谱法从牛樟芝发酵物中分离安卓奎诺尔的方法，其特征在于：包括以下步骤：

1)取牛樟芝发酵粉末，用40倍体积的乙酸乙酯溶液浸泡30min后，60℃下超声提取90min，然后，过滤得到澄清提取液，低温旋干，得到含安卓奎诺尔的牛樟芝粗提物；

2)将高速逆流色谱两相溶剂体系置于分液漏斗中，摇匀、静置分层，平衡后，将上、下两相分离；其中高速逆流色谱溶剂体系是石油醚：乙酸乙酯：甲醇：水，体积比为4：1：4：1；

3)将步骤1)所得到的安卓奎诺尔粗提物用步骤2)的上相和下相各5mL混合溶解，制得进样样品；

4)取上相作固定相，以10-15mL/min流速填充满整个逆流色谱仪中得色谱柱，并设定恒温循环器温度为25℃；以700-900rpm转速正转，开启逆流色谱仪主机后取下相做流动相，并以2.0mL/min流速泵入色谱柱内，待仪器达到动力学平衡时，开启固定波长254nm的检测器采集数据，基线平稳后将步骤3)得到的样品溶液经由进样阀进样；根据检测器图谱收集目标组分，合并减压浓缩干，得到安卓奎诺尔。

2.根据权利要求1所述的一种高速逆流色谱法从牛樟芝发酵物中分离安卓奎诺尔的方法，其特征在于：所述的步骤4)还包括高效液相色谱检测步骤，该步骤是将所收集的目标组分先进行高效液相色谱检测，再合并特征峰位置相同、纯度较高的目标组分，减压蒸干；其中所述的高效液相色谱检测条件为：色谱柱规格：ZORBAX Eclipse XDB C 18 ，4.6mm×25mm，5μm；柱温：28℃；流动相：乙腈和0.5％乙酸-水；梯度洗脱；流速为1.0mL/min；紫外检测器波长：254nm。

3.根据权利要求1所述的一种高速逆流色谱法从牛樟芝发酵物中分离安卓奎诺尔的方法，其特征在于：所述的乙酸乙酯溶液是体积浓度为90-100％乙酸乙酯。