[发明专利]一种乌桕茎段高效再生体系的建立方法

说明书

一种乌桕茎段高效再生体系的建立方法，其步骤如下：第一步：制备获得无菌材料‑无菌乌桕茎段；第二步：茎段诱导芽的萌发；第三步：芽诱导生根；第四步：炼苗和移栽。切取茎长1.0~1.5 cm的芽，以1/2MS为基本培养基，添加0.5 mg/L IBA和0.05 mg/L NAA，15~20 d内即可生根良好。乌桕幼苗在组培室内经历了两个阶段的逐步壮苗过程，移栽至草炭土、珍珠岩和蛭石（3:2:1）构成的混合基质，其土壤营养，含水量及通透性都有保障，移栽成活率大大提高。利用上述技术方法建立乌桕组培再生体系，操作简便，污染率低，成活率高，培养周期短。

技术领域

本发明提供了一种乌桕的再生体系建立方法，能够有效降低乌桕的培育成本。

背景技术

乌桕（Sapiumsebiserum）又名木蜡树、蜡子树，为大戟科乌桕属落叶乔木，喜光、耐旱、可耐短期积水，在含盐率0.3 %以下的盐碱地亦可生长。乌桕广泛分布于我国，多集中于长江及珠江流域等地栽培，为我国特有的经济树种。乌桕是我国四大木本油料植物之一，还是珍稀的园林绿化观赏树种，其树冠整齐，叶形秀丽，叶色入秋后红艳美观，可孤植、丛植于草坪、湖畔和池边，在园林绿化中可作为护堤树、庭荫树及行道树。

目前，乌桕的繁殖方式以播种和扦插为主，扦插或嫁接等繁殖虽可保持原株优良特性，但繁殖系数较低，严重影响良种推广进程。采用组培快繁技术，可在短期内获得大量优良无性系苗木，满足对优质种苗的需求。乌桕组培方面的研究也有少量报道，但存在着易褐化、落叶死苗等严重问题，同时会有组培效率低下，周期长的问题。

发明内容

本发明的目的是选用最佳的植物生长调节剂，优化乌桕离体快繁的过程，建立系统的微繁体系，在最短的时间内生产出大量优质乌桕种苗，进行大规模生产，以满足市场的需求，促进乌桕产业化的进一步发展。

本发明提供了如下的技术方案：

一种乌桕茎段高效再生体系的建立方法，其步骤如下：

第一步：制备获得无菌材料-无菌乌桕茎段；

第二步：茎段诱导芽的萌发；

第三步：芽诱导生根；

第四步：炼苗和移栽。

所述制备获得无菌材料-无菌乌桕茎段方法如下：

剪取生长健壮且无病虫害的乌桕当年生枝条，将枝条剪成1.5~3.0 cm长度的茎段，保证每个茎段上至少留有一个饱满的芽体，且芽的生长位置位于茎段上端1/3处。将剪好的茎段放入玻璃烧杯中，置于流动水下流动冲洗30~50 min。用1000倍的多菌灵溶液浸泡30~40 min，20%的84消毒液中浸泡30 s，将茎段用蒸馏水冲洗5次，放入超净工作台内。75%酒精浸泡30 s，放入15%次氯酸钠溶液（每升量中加入3滴吐温80）中浸泡10 min，无菌水冲洗5次，晾干。

所述的茎段诱导芽的萌发方法如下：

将获得的茎段外植体接种到芽诱导培养基中，培养基为NN69+0.5 mg/L TDZ +0.05 mg/L IBA，每升培养基中添加25 g 蔗糖和7.5 g 琼脂，pH调至5.8。在光照强度为2800 Lux、培养室温度为25±2 ℃、光周期为16 h/d下培养15~20 d；

所述的芽诱导生根方法如下：

将上一步培育良好的芽，在无菌条件下取出，切下茎长1.0~1.5 cm的芽，接种在诱导不定根的生根培养基上，生根培养基以1/2MS为基本培养基，添加0.5 mg/L IBA和0.05mg/L NAA，每升培养基中添加30 g 蔗糖和6.5 g 琼脂，pH调至5.8。在光照强度为2800Lux、培养室温度为25±2 ℃、光照条件为16 h/d下培养15~20 d；

所述的炼苗和移栽方法如下：