[发明专利]一种秋子梨茎段高效再生体系的建立方法

权利要求书

1.一种秋子梨茎段高效再生体系的建立方法，其特征在于：处理步骤如下：

第一步，制备秋子梨无菌材料，即选取秋子梨当年生枝条，将枝条剪成1 .0 ~ 2 .0 cm长度的茎段，放入容器中，浸入含有洗衣粉的水溶液中清洗，随后置于自来水下流动冲洗，用稀释的多菌灵溶液浸泡后，再用稀释的消毒液浸泡，将茎段用蒸馏水冲洗，移入无菌环境中，75%酒精浸泡后，放入次氯酸钠溶液中浸泡，无菌水冲洗，处理干净茎段表面的水分；第二步，即将无菌秋子梨茎段培养形成芽，将第一步获得的灭菌茎段外植体接种到芽诱导培养基中，在光照强度为2800 Lux，培养室温度为25±2 ℃，光周期为16 h/d下培养20 ~ 25d，无菌秋子梨茎段培养形成芽，所述的芽诱导的培养基为改良1/2MS+2 .0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA+30 g蔗糖+7 .5 g 琼脂，其中改良1/2MS是1/2MS去除肌醇，pH调至5 .5 ~ 6.0； 第三步，芽诱导生根，将第二步获得的材料在无菌条件下取出诱导良好的芽，切下茎长1 .0 ~ 1 .5 cm的芽，接种在诱导不定根的生根培养基上，进行生根培养，在光照强度为2800 Lux，培养室温度为25±2 ℃，光照条件为16 h/d下培养15 ~ 20d，至芽生根形成幼苗，所述的生根培养基为WPM为基本培养基+1 .5 mg/L IBA+0 .15 mg/L NAA；第四步：炼苗和移栽；将第三步中已经生根良好的秋子梨幼苗组培瓶进行开盖炼苗，首先开启三分之一大小的开口，组培室内放置3 d，再将瓶口完全开启，继续放置3 d，取出幼苗，用自来水洗净根部残留的培养基，移栽至混合基质。

2.根据权利要求1所述的一种秋子梨茎段高效再生体系的建立方法，其特征在于：所述的茎段上至少有一个饱满的芽体，且芽的生长位置位于茎段上端1/3处。

3.根据权利要求1所述的一种秋子梨茎段高效再生体系的建立方法，其特征在于：所述的混合基质由草炭土、珍珠岩和蛭石构成，比例为3:2:1。