[发明专利]低浓度二氧化氯高效诱导菊花一步成苗的方法

说明书

本发明公开了低浓度二氧化氯高效诱导菊花一步成苗的方法，在菊花培养基中添加低浓度二氧化氯，诱导菊花茎叶与根系同时生长，不需分阶段培养即可完成菊花组织培养；所述的二氧化氯浓度1～20μg/L，所述的培养基含有或不含有外源激素，培养20天即可获得生长健壮且根系发达的菊花植株，移栽成活率达到100%。本发明通过低浓度二氧化氯促进植株生长和生根，在高效诱导菊花高效再生的同时，摆脱了当前组培中对外源激素的依赖，无环境安全性风险，降低生产成本，实现菊花快繁的一步成苗，适用于规模化菊花组培苗的生产，提高产业价值。

技术领域

本发明涉及植物组织培养领域，更确切地说涉及低浓度二氧化氯高效诱导菊花一步成苗的方法。

背景技术

菊花（Dendranthema morifolium (Ramat.) Tzvelev）为菊科、菊属的多年生宿根草本植物，具有巨大的观赏、药用、食用和茶饮价值。菊花产业链已发展已较为完善，成为很多城市的重要支柱产业。在菊花生产中，主要采应用营养繁殖的方法，如扦插、分株等，但长期的营养繁殖导致病毒感染严重，大大降低了菊花的产量和质量。植物病毒病至今还没有很好的控制方法，最有效办法就是进行脱毒培养。因此，采用脱毒组培苗是生产中提高菊花产量和品质的有效途径。

关于菊花组织培养快繁技术研究已成熟，但存在步骤繁琐的问题，且大多还处在实验室研究阶段。在已报道的菊花组培研究中，都通过在培养基中添加不同外源激素实现材料增殖、壮苗和生根培养。然而，规模化生产要求操作程序简单，当前繁琐的操作限制了培养技术的规模化应用。发明专利CN102550417A公布了一种杭白菊一步成苗快繁技术，利用添加不同外源生长素和细胞分裂素组合实现菊花培养。

二氧化氯为一种环境友好的消毒剂广泛应用于生产生活多个方面。前期研究中我们发现其在植物外植体和培养基的消毒中有巨大的应用潜力。但远低于有效消毒浓度的微量二氧化氯处理是否对能否促进菊花组织培养再生还不清楚。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种经济高效而又简化的适合于工厂化生产的菊花一步成苗培养方法。

本发明所采用的技术方案是：以无菌菊花苗为试验材料，在含有或不含有外源激素的培养基中添加低浓度二氧化氯，诱导菊花茎叶与根系同时生长，不需分阶段培养即可高效完成菊花组织培养和移栽。

低浓度二氧化氯高效诱导菊花一步成苗的方法，其特征在于在培养基中添加低浓度二氧化氯，一步再生成可直接移栽的完整植株。所述的低浓度二氧化氯通过调控菊花内源生长素和细胞分裂素代谢，进而使得菊花生根时间显著提前、茎叶生长健壮，能替代外源激素的作用。

所述的菊花包括亳菊、杭菊、滁菊、淮菊。

所述的二氧化氯浓度为1～20 μg/L。

所述的培养基为添加或不添加外源激素的MS培养基。

所述的菊花一步成苗是指20天植株茎叶部分长至3～5 cm长，根系达到10～18条左右，直接移栽成活率达到100%。

所述的MS培养基包括1,900 mg/L 硝酸钾、1,650 mg/L硝酸铵、170 mg/L 磷酸二氢钾、370 mg/L七水硫酸镁、440 mg/L二水氯化钙、27.85 mg/L 七水硫酸铁、37.25 mg/L乙二胺四乙酸二钠、22.3 mg/L 四水合硫酸锰、8.6 mg/L七水硫酸锌、6.2 mg/L 硼酸、0.83mg/L 碘化钾、0.025 mg/L五水硫酸铜、0.25 mg/L二水合钼酸钠、0.025 mg/L 六水氯化钴、2.0 mg/L甘氨酸、0.1 mg/L 盐酸硫胺素、0.5 mg/L 盐酸吡哆辛、0.5 mg/L 烟酸、100 mg/L肌醇。