[发明专利]一种大叶杨的组织培养方法及其培养基组合

权利要求书

1.一种大叶杨组织扩繁培养方法，所述培养方法包括如下步骤：

(a)愈伤组织诱导

将大叶杨外植体接种到诱导愈伤培养基中进行诱导培养，形成大叶杨愈伤组织；所述大叶杨外植体为大叶杨叶片；

所述诱导愈伤培养基为包括5-9g/L琼脂、25-35g/L蔗糖、0.4-1.0mg/L 6-BA、0.1-0.8mg/L KT、0.3-1.0mg/L NAA的WPM培养基；

(b)生芽培养

将所述大叶杨愈伤组织切分成愈伤团，将所述愈伤团接种到生芽培养基中进行生芽培养，形成长有不定芽的大叶杨植株；

所述生芽培养基为包括5-9g/L琼脂、25-35g/L蔗糖、0.3-1.0mg/L6-BA、0.1-0.7mg/LKT、0.1-0.4mg/L NAA的WPM培养基；

(c)生根培养

将长有不定芽的大叶杨植株接种到生根培养基中进行生根培养，形成长有不定芽和根的大叶杨植株；

所述生根培养基为包括5-9g/L琼脂、25-35g/L蔗糖、0.2-0.8g/L活性炭、0.9-1.6mg/LIBA的WPM培养基；

所述培养方法还包括如下步骤：

(d)愈伤继代培养

将所述大叶杨愈伤组织接种到愈伤继代培养基中进行愈伤继代培养，对所述大叶杨愈伤组织进行继代培养；

所述愈伤继代培养基为包括5-8g/L琼脂、20-30g/L蔗糖、0.05-0.5mg/L6-BA、0.05-0.5mg/L KT、0.05-0.4mg/L NAA的WPM培养基。

2.如权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述诱导愈伤培养基为包括5-8g/L琼脂、25-35g/L蔗糖、0.5-0.8mg/L 6-BA、0.2-0.4mg/L KT、0.4-0.6mg/L NAA的WPM培养基。

3.如权利要求2所述的培养方法，其特征在于，所述诱导愈伤培养基为包括6.5g/L琼脂、30g/L蔗糖、0.7mg/L6-BA、0.3mg/L KT、0.5mg/L NAA的WPM培养基。

4.如权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述诱导愈伤培养基的PH为5.8±0.5。

5.如权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述生芽培养基为包括5-9g/L琼脂、25-35g/L蔗糖、0.6-0.8mg/L6-BA、0.4-0.6mg/L KT、0.1-0.2mg/L NAA的WPM培养基。

6.如权利要求5所述的培养方法，其特征在于，所述生芽培养基为包括6.5g/L琼脂、30g/L蔗糖、0.7mg/L 6-BA、0.5mg/L KT、0.15mg/L NAA的WPM培养基。

7.如权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述生芽培养基的PH为5.8±0.5。

8.如权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述生根培养基为包括5-9g/L琼脂、25-35g/L蔗糖、0.4-0.6g/L活性炭、1.1-1.3mg/L IBA的WPM培养基。

9.如权利要求8所述的培养方法，其特征在于，所述生根培养基为包括7g/L琼脂、30g/L蔗糖、0.5g/L活性炭、1.2mg/L IBA的WPM培养基。

10.如权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述生根培养基的PH为5.8±0.5。

11.如权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述大叶杨叶片是按照如下方法得到的：将大叶杨枝条进行冲洗、浸泡和水培培养，大叶杨枝条上长出的幼嫩叶片即为所述大叶杨叶片。

12.如权利要求11所述的培养方法，其特征在于，所述冲洗时间为18-30h。