[发明专利]一种苹果酵素及其制备方法

权利要求书

1.一种苹果酵素的制备方法，其特征在于，将含有发酵液和苹果料的发酵罐中接种发酵乳杆菌和小片球菌混合菌悬液，得到发酵体系，同时加入纤维素酶和果胶酶以及苏氨酸，调节pH值，在30-35℃下发酵3-5h，加入维生素料和微量元素料，升温至35-40℃，继续发酵6-8h，加入天冬氨酸和半胱氨酸，继续发酵35-37h，离心，浓缩，得到苹果酵素。

2.根据权利要求1所述苹果酵素的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

S1.培养基的配置：将蛋白胨、酵母粉、葡萄糖、柠檬酸、吐温、硫酸镁、琼脂、碳酸钙、氯化锰、维生素C、蒸馏水混合均匀后，灭菌；

S2.混合菌悬液的配置：将发酵乳杆菌和小片球菌分别37℃活化增殖培养24h后，接种至步骤S1所述的培养基中，于35-40℃恒温培养24-48h，直至菌浓度达到2×10⁹cfu/mL；

S3.苹果的前处理：将新鲜苹果洗净、去皮后，切碎，冷冻干燥，粉碎至100目-200目，15-20℃下干燥保存，得到苹果粉；

S4.苹果酵素的制备：将步骤S3中的苹果粉加入发酵罐，按照固液比1g：(3-7)mL加入发酵液，并将步骤S2中的混合菌悬液接种于发酵罐内，得到发酵体系，同时加入纤维素酶和果胶酶，并加入苏氨酸，用氨水调节pH值，在30-35℃下发酵3-5h后，加入维生素料和微量元素料，混合均匀后，升温至35-40℃，继续发酵6-8h，加入天冬氨酸和半胱氨酸，混合均匀后，继续发酵35-37h，发酵过程中通过氨水调节pH值，发酵结束后，灭菌，离心，弃除固体，液体通过超滤膜浓缩后，冷冻干燥，得到苹果酵素。

3.根据权利要求2所述苹果酵素的制备方法，其特征在于，步骤S1中所述培养基由以下原料按重量份制备而成：蛋白胨5-15份、酵母粉2-7份、葡萄糖2-7份、柠檬酸1-3份、吐温-800.5-1.5份、硫酸镁0.1-0.3份、琼脂10-20份、碳酸钙5-10份、氯化锰0.1-0.2份、维生素C1-3份、蒸馏水800-1200份。

4.根据权利要求2所述苹果酵素的制备方法，其特征在于，步骤S1和步骤S4中所述灭菌条件为在120-125℃保持10-20min。

5.根据权利要求2所述苹果酵素的制备方法，其特征在于，步骤S2中所述发酵乳杆菌和小片球菌的质量比为(2-5)：(1-3)。

6.根据权利要求2所述苹果酵素的制备方法，其特征在于，步骤S3中所述冷冻干燥条件为-10℃保持10-20min后，-20℃保持10-20h。

7.根据权利要求2所述苹果酵素的制备方法，其特征在于，步骤S4中所述混合菌悬液的接种量为2-4％(v/v)；所述纤维素酶和果胶酶的质量比为1：(0.5-2)，酶活力分别为50-100U/g和20-50U/g，添加量为体系总质量的2-5％；所述苏氨酸的添加量为体系总质量的0.5-1％；所述维生素料的添加量为体系总质量的1-2％；所述微量元素料的添加量为体系总质量的0.2-0.5％；所述天冬氨酸的添加量为体系总质量的0.7-1.2％；所述半胱氨酸的添加量为体系总质量的0.5-1％；所述pH值调节在7.5-8.5内。

8.根据权利要求2所述苹果酵素的制备方法，其特征在于，步骤S4中所述维生素料为维生素B12和维生素K，质量比为1：(2-3)；所述微量元素料为氯化钙和硫酸亚铁，质量比(1-3)：1。

9.根据权利要求2所述苹果酵素的制备方法，其特征在于，步骤S4中所述发酵液由以下原料按重量份混合而成：蛋白胨5-10份、氯化铵1-3份、磷酸氢二钾2-4份、尿素2-5份、氯化钠1-2份、七水合硫酸锌0.2-0.5份、氯化锰0.1-0.3份、去离子水200-500份。

10.一种如权利要求1-9任一项权利要求所述的制备方法制得的苹果酵素。