[发明专利]一种相思子毒素快速定量检测卡

说明书

本发明公开了一种相思子毒素快速定量检测卡，包括外壳内的PVC底板、吸水垫、硝酸纤维素膜、标记物垫、样品垫和稀释液垫；硝酸纤维素膜固定在PVC底板上，在硝酸纤维素膜左端搭接吸水垫，右端搭接稀释垫，在硝酸纤维素膜中部靠右设置标记物垫，标记物垫上设置样品垫，在硝酸纤维素膜上吸水垫与标记物垫之间设置质控线和检测线；在外壳上壳对应检测线和质控线开设视窗孔，在检测线和靠近标记物垫方向的视窗孔边上有定量标识线，对应样品垫开设加样孔，对应稀释垫开设清洗孔。本发明采用加样孔加样品、清洗孔加稀释液和通过定量标识线控制样本侧流液量的层析免疫方法，提高了被检测物灵敏性、精密性，还保留了快诊检测方法的快速和简便特性。

技术领域

本发明属于生物检测领域，具体涉及一种相思子毒素快速定量检测卡。

背景技术

相思子毒素(Abrin toxin，AT)是从豆科藤本植物相思豆(Abrus precatorius)的种子中提取的一种毒素蛋白，其分子结构与中毒机理与蓖麻毒素(Ricin toxin,RT)极 为相似，相对分子量介于63～67kDa之间，具有A-B链结构特征，属于Ⅱ型核糖体 失活蛋白，为剧毒性蛋白。AT的小鼠的LD50为0.04μg/kg，对人的致死剂量为0.1～ 1μg/kg，摄入的致死剂量为5.0～7.0μg/kg，是蓖麻毒素(小鼠LD50 3.0μg/kg)的70 多倍。由于毒性强、来源广，且在较低技术条件下便可大量制备，AT是生物武器核查 清单中唯一的两种植物毒素之一，也是重要的生物恐怖剂之一。面对防生物战和反生 物恐怖的迫切需求，相思子毒素的快速检测和防治已成为一个研究热点，因此，开展 两种毒素蛋白标准物质研制及其定值与快速检测方法的研究，具有十分重要的军事和 社会意义。

但由于相思子毒素没有特异的化学基团，用物理和生化方法难以鉴别，只能依赖免疫学检测方法。其中ELISA法是国际最经典的方法，灵敏度可达ng/mL，但因操作 复杂、检测设备体积大、耗时长，应用相对受限；胶体金免疫层析试纸条利用胶体金 标记技术的可视定位性质，摆脱了专用的仪器设备的限制但只能做到半定量检测，灵 敏度也较低。因此，寻求新的对相思子毒素快速、有效的鉴定方法，具有十分现实的 军民两用价值。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明提供了一种相思子毒素双孔定量检测卡。

本发明的目的通过下述技术方案来实现：

首先，本发明提供了一种相思子毒素检测试纸条，包括PVC底板、吸水垫、硝酸 纤维素膜、标记物垫、样品垫和稀释液垫；所述硝酸纤维素膜固定在PVC底板上，所 述硝酸纤维素膜一端搭接吸水垫，另一端搭接稀释液垫；所述标记物垫放置在所述硝 酸纤维素膜上且位于所述稀释液垫前方，所述吸水垫的方向定义为前方；所述标记物 垫上设置所述样品垫；在所述硝酸纤维素膜上从标记物垫到吸水垫依次设置检测线(T 线)和质控线(C线)；在所述标记物垫和检测线(T线)之间设置定量标识线(M线)；

所述标记物垫上包被有标记物标记的鸡IgY抗体、标记物标记的相思子毒素多抗；所述检测线处包被相思子毒素多抗，所述质控线上包被羊抗鸡IgY抗体的IgG。

所述标记物适用胶体金、荧光素、镧系荧光、彩色乳胶、量子点、上转换荧光物 质、磁荧光微球、以及酶标记物、化学发光物质；具体可为镧系荧光微球。

作为优选，所述样品垫上面可设置相应的滤物垫，如滤血垫等。

作为优选，所述标记物垫上还加入色素，以显示待测样本液侧流过程，便于肉眼观察或仪器自动监测控制。

作为优选，当色素被稀释液冲洗干净后，在稀释液耗尽后，色素再次流入检测窗口时，应停止结果判读。

作为优选，所述硝酸纤维素膜与所述吸水垫搭接的重叠宽度为1-2mm；所述硝酸纤维素膜与所述稀释液垫搭接的重叠宽度为1-2mm。标记物垫放置在稀释液垫前方， 并在标记物垫和稀释液垫之间保留1-10mm硝酸纤维素膜裸露空隙。