[发明专利]基于偶联反应的荧光共振能量转移探针的甲醛检测方法

权利要求书

1.一种基于偶联反应的荧光共振能量转移探针的甲醛检测方法，其特征在于，包括步骤：

将待测样品溶解于反应介质中，并在溶解有待测样品的所述反应介质中加入带荧光基团的胺类、带荧光基团的炔烃以及金属催化剂，得到原始反应溶液；

对所述原始反应溶液进行荧光检测，确定所述原始反应溶液对应的第一荧光发射峰强度；

对所述原始反应溶液进行加热，使所述待测样品中的甲醛、所述带荧光基团的胺类以及所述带荧光基团的炔烃在所述金属催化剂的催化作用下发生金属催化偶联反应，得到目标反应溶液，对原始反应溶液进行加热后，在加热条件下，待测样品中的甲醛、带荧光基团的胺类以及带荧光基团的炔烃在金属催化剂催化下会发生金属催化偶联反应，形成炔丙胺产物；

对所述目标反应溶液进行荧光检测，确定所述目标反应溶液对应的第二荧光发射峰强度；

根据所述第一荧光发射峰强度和所述第二荧光发射峰强度，确定所述待测样品中的甲醛浓度；

其中，所述带荧光基团的胺类为其中，荧光基团R1为香豆素或荧光素；

所述带荧光基团的炔烃为其中，荧光基团R2为香豆素或荧光素；

所述带荧光基团的胺类、带荧光基团的炔烃和金属催化剂的浓度比为1:1:0.02～0.1；

所述金属催化剂为

中的一种；

所述反应介质为水、1,2-二氯乙烷、二甲基甲酰胺、二恶烷和乙酸乙酯中的一种或多种；

所述根据所述第一荧光发射峰强度和所述第二荧光发射峰强度，确定所述待测样品中的甲醛浓度的步骤包括：

根据所述第一荧光发射峰强度和所述第二荧光发射峰强度，确定荧光比；

根据所述荧光比以及预先确定的荧光比与甲醛浓度的对应关系，确定所述待测样品中的甲醛浓度；

所述荧光比的计算公式为：

R＝1–F_470nm(T16)/F_470nm(T0)

其中，R为荧光比，F_470nm(T16)为第二荧光发射峰强度，F_470nm(T0)为第一荧光发射峰强度；

当所述带荧光基团的胺类的荧光基团为香豆素时，所述带荧光基团的炔烃的荧光基团为荧光素；当所述带荧光基团的胺类的荧光基团为荧光素时，所述带荧光基团的炔烃的荧光基团为香豆素。