[发明专利]用于肺结节良恶性检测的甲基化标记物或其组合及应用

说明书

本发明涉及到与肺结节良恶性相关的生物标记物组合，包括有以下的至少一种：cg07553761,cg22685975,cg04688351,cg07160746,cg13146465等共200种标记物。本发明还涉及了上述标记物组合的检测和相关试剂盒。本发明所述20个标志物具备与100个标志物组合基本相同的诊断力。本发明联合分析至少1个基因组片段上的多个甲基化胞嘧啶的共甲基化特征作为判断肺结节良恶性发病的生物标记物，其准确度远大于其它蛋白血浆生物标记物的检测，尤其在I期肺癌的区分上；在非实性结节中，准确度远高于PET‑CT，可有效起到排阴的效果，降低假阳性的发生。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及用于肺结节良恶性检测的甲基化标记物或其组合及应用。

背景技术

肺癌是全球范围内癌症死亡的最常见原因，发病率居于所有恶性肿瘤之首。由于环境的污染，肺癌的发病率逐年上升，我国每年肺癌患者约78.1万，死亡病例约62.6万，位于癌症死亡首位。预计至2025年，我国每年新发肺癌患者将达100万。由于绝大多数临床诊断肺癌病例多已为晚期，失去手术治疗机会，肺癌预后极差，我国肺癌的5年生存率仅为16.1％。Goldstraw等研究发现早期Ⅰa期肺癌经手术切除，其5年生存率可达到80％以上，而中晚期Ⅲa～IV期肺癌在手术治疗后，其5年生存率在36％以下，因此，肺癌的筛查是改善肺癌生存，降低肺癌死亡率的希望所在。

肺癌早期以肺结节形式存在，是一种临床中常见的现象，包括良性结节和恶性结节，恶性肺结节早期发现比较隐匿，如果不早期干预，其病程迅速、恶性度强、预后差。目前对肺结节的定性诊断有很多困难，在临床外科切除的肺结节中，30％左右为良性的，所以正确评价肺结节的良恶性，有助选择正确的治疗手段，且可以帮助显著提高患者的生存率改善预后。

现有肺部小结节的诊断方法有多种，但定性诊断较为困难。目前肺部小结节诊断的常用方法包括：影像学检查、经皮穿刺活组织检查、虚拟支气管镜导航系统下的活组织检查及胸腔镜手术病理组织检查：1)影像学检查因其无创性而普遍使用，其主要观察肺部小结节的大小、体积、体积倍增时间及形态特征。常用的影像学检查方法主要有胸部CT、正电子发射型计算机断层显像(positron emission tomography-computed tomography，PET-CT)等。影像学检测存在问题比较明显，例如使用CT会有过高的假阳性，可能导致过度诊断、过度治疗、医疗资源的浪费及增加受检者焦虑心理。PET-CT仅对实性结节检测效果明显，对于磨玻璃等非实性结节效果不尽如人意。2)当PET诊断的灵敏度不佳或显现出假阳性指征时，可选用CT引导下的经皮肺穿刺活组织检查，诊断准确率约为90％。但X线、CT或超声引导下经皮肺穿刺活组织检查较易导致出血、气胸、猝死等严重并发症。近年开展的VBN是一种基于CT的三维成像术，其通过图像识别建立虚拟支气管路径，引导支气管镜到达目标病灶进行活组织检查，从而达到提高肺小结节活组织微创检查阳性率的目的。但实际操作中，因为活检导致的院内感染等问题也极为普遍。

综上，筛查肺部结节及精准地进行良、恶性质的鉴别诊断是肺癌防治急需解决的重大问题。当前亟需针对此临床痛点寻找并建立有效的诊断模型以及能够作为筛查与诊断的分子标记物。