[发明专利]一种鼠李糖乳杆菌胞外多糖及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种鼠李糖乳杆菌胞外多糖的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

利用鼠李糖乳杆菌进行厌氧发酵，对发酵液通过醇沉法提取获得粗胞外多糖，再通过分子筛层析对其进行分离纯化，最终获得鼠李糖乳杆菌胞外多糖；

所述的鼠李糖乳杆菌是从香满楼牌酸牛奶中分离纯化得到。

2.根据权利要求1所述的鼠李糖乳杆菌胞外多糖的制备方法，其特征在于具体包括如下步骤：

(1)将鼠李糖乳杆菌进行厌氧发酵培养，得发酵培养液；

(2)发酵培养液经离心除菌体取上清，高温灭活处理，再加入三氯乙酸除蛋白，得到上清液；

(3)将上清液采用醇沉法提取多糖，得到的产物进行真空冷冻干燥，即得粗胞外多糖，记为EPS-1；

(4)粗胞外多糖在Sephacryl TM-S-200HR柱上进行进一步纯化，真空冷冻干燥得到鼠李糖乳杆菌胞外多糖，记为EPS1-1。

3.根据权利要求2所述的鼠李糖乳杆菌胞外多糖的制备方法，其特征在于：

步骤(1)中，将鼠李糖乳杆菌按照3％体积比的接种量接种于MRS肉汤培养基，于37±0.5℃发酵培养12～24h，得到发酵培养液。

4.根据权利要求2所述的鼠李糖乳杆菌胞外多糖的制备方法，其特征在于：

步骤(2)中，高温灭活处理的方法为：在100℃的高温下煮沸15～20分钟；

步骤(2)中，加入三氯乙酸除蛋白的方法为：在高温灭活处理后的上清中加入三氯乙酸至终浓度为4.5～5.5％m/v，然后搅拌使三氯乙酸充分反应，离心，除去残留细胞和沉淀蛋白，得到上清液。

5.根据权利要求2所述的鼠李糖乳杆菌胞外多糖的制备方法，其特征在于：

步骤(3)中，醇沉法为：在上清液中加入2～4倍体积的无水乙醇，于3～5℃放置8～12h，离心，取沉淀进行真空冷冻干燥，即得粗胞外多糖，记为EPS-1。

6.根据权利要求2所述的鼠李糖乳杆菌胞外多糖的制备方法，其特征在于：

步骤(4)中，粗胞外多糖溶于超纯水中，在Sephacryl TM-S-200HR柱上进行进一步纯化，以超纯水为洗脱剂，上样量为4.8mL，流速设定为0.6～0.8mL/min。

7.一种鼠李糖乳杆菌胞外多糖，其特征在于：

所述的鼠李糖乳杆菌胞外多糖为均一组分，其分子量为88650Da；

所述鼠李糖乳杆菌胞外多糖包含甘露糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、木糖、半乳糖和阿拉伯糖，其中，摩尔比为：甘露糖：葡萄糖醛酸：葡萄糖：木糖：半乳糖：阿拉伯糖＝31.19：23.01：36.62：2.03：3.57：3.58。

8.根据权利要求7所述的鼠李糖乳杆菌胞外多糖，其特征在于：通过权利要求1～6任一项所述的制备方法制备得到。

9.权利要求7或8所述的鼠李糖乳杆菌胞外多糖在制备降糖的产品中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述的鼠李糖乳杆菌胞外多糖作为α-葡萄糖苷酶抑制剂的应用。