[发明专利]一种测定氨基酸类药物中两种氯代烷基因毒杂质的方法

权利要求书

1.一种测定氨基酸类药物中两种氯代烷基因毒杂质的方法，其特征在于用气相质谱联用分析仪能快速、准确的测定一种氨基酸类化学原料药中氯代叔丁烷、1-氯丁烷这两种基因毒性杂质的含量，该方法检测灵敏度高，检测结果准确可靠，该测定方法包括如下步骤：

(1)供试品溶液的制备

取本氨基酸类化学原料药约0.1g，精密称定，置20ml顶空瓶中，加二甲基亚砜2ml，摇匀，密封，超声，作为供试品溶液；

(2)对照品溶液的制备

称取氯代叔丁烷和1-氯丁烷对照品适量，加二甲基亚砜溶解并定量稀释成每1ml中含氯代叔丁烷和1-氯丁烷分别为0.1μg的混合溶液，量取该混合溶液2ml，置20ml顶空瓶中，密封，作为对照品溶液；

(3)色谱条件

仪器：气相质谱联用分析仪，检测器为单重四极杆检测器；

色谱柱：DB-624毛细管色谱柱(30m*0.32mm*1.8μm)；

升温程序：40℃保持10min，40℃/min升温至240℃保持3min；

流速：2ml/min；

MS Sourse：250℃；

MS Quad：150℃；

SIM模式：m/z＝43(氯代叔丁烷定量离子)，77(1-氯丁烷定量离子)；

Gian factor：1.00；

采集时间范围：0～12min；

进样口温度及分流比：200℃，2∶1；

顶空平衡温度及时间：90℃，30min；

定量阀温度：100℃；

传输线温度：110℃；

进样量：1ml；

气相循环时间：25min

进样时间：1min

(4)样品检测

系统适用性试验：精密取对照品溶液进样5次，记录色谱图，提取m/z为77和43的离子峰，m/z为77的离子峰为氯代叔丁烷，m/z为43的保留时间约5.9min离子峰为1-氯丁烷，计算5针中氯代叔丁烷与1-氯丁烷的峰面积RSD，应≤5％，表明系统适用性符合要求；

取供试品溶液进样测定，记录色谱图，外标法以峰面积计算供试品中氯代叔丁烷与1-氯丁烷的含量；

计算公式如下：

式中：

A_T：供试品溶液中待测成分的峰面积；

M_T：供试品的称样量，mg；

A_S：对照品溶液中成分的峰面积；

M_S：对照品溶液中成分的称样量，mg；

V_S：对照品溶液中成分的稀释倍数。