[发明专利]一种乳腺癌特异靶向分子探针及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种乳腺癌特异靶向分子探针，其特征在于：所述探针为cRGD-MNPs，其包括黑色素纳米颗粒MNP，外部通过聚乙二醇PEG修饰偶联三肽RGD。

2.一种权利要求1所述的乳腺癌特异靶向分子探针的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

S1、将20mg黑色素加入6mL的0.1N NaOH水溶液中搅拌溶解，得到碱性黑色素溶液；

S2、将0.1N HCl水溶液迅速滴入S1所得碱性黑色素溶液中，并通过超声处理将pH调节至7.0，得到a溶液；

S3、加入去超纯水并重复4-5次洗涤离心a溶液，直至滤出液澄清透明得出黑色素溶液，冷冻干燥得到固体黑色素纳米颗粒MNPs；

S4、称取10mg MNPs分散于10ml超纯水中，滴加NaOH水溶液调节pH至9.5，得到b溶液；

S5、称取50mg NH2-PEG5000-NH2，加入5ml超纯水，滴加NaOH水溶液调节pH至9.5，得到c溶液；

S6、混合b溶液和c溶液，搅拌反应得到d溶液

S7、加入超纯水并重复5次洗涤离心d溶液，除去未结合的PEG，收集剩余溶液冷冻干燥得到偶联PEG的黑色素纳米颗粒PEG-MNPs；

S8、将1.2mg氨基-巯基交联剂溶于36μL二甲基亚砜中得到e溶液；

S9、称取1mg固体PEG-MNP溶解于1mL磷酸缓冲盐溶液，并调节PH至7.2,得到f溶液；

S10、混合e溶液和f溶液，搅拌反应，所得溶液经过滤除去过量的氨基-巯基交联剂和副产物后，得到SMCC-PEG-MNPs溶液；

S11、将120μL、5mM的靶向环肽溶液加入SMCC-PEG-MNPs溶液中旋转搅拌，所得溶液经过滤除去未偶联的RGD肽后，浓缩过滤得到最终产物cRGD-MNPs。

3.如权利要求2所述的乳腺癌特异靶向分子探针的制备方法，其特征在于：步骤S2中所述超声处理的输出功率40W。

4.如权利要求2所述的乳腺癌特异靶向分子探针的制备方法，其特征在于：步骤S6中所述b溶液和c溶液搅拌反应的条件为室温，反应时间为24h。

5.如权利要求2所述的乳腺癌特异靶向分子探针的制备方法，其特征在于：步骤S3和S7中洗涤离心采用截留分子量均为30kDa的超滤离心管，其中步骤S3离心转速为4000rpm，离心时间为15min，步骤S6离心转速为4000rpm，离心时间为15min。

6.如权利要求2所述的乳腺癌特异靶向分子探针的制备方法，其特征在于：步骤S10中所述e溶液和f溶液的搅拌反应的条件为室温，反应时间为2h。

7.如权利要求2所述的乳腺癌特异靶向分子探针的制备方法，其特征在于：步骤S11中所述旋转搅拌的温度为4℃，旋转搅拌的时间为24h。

8.如权利要求2所述的乳腺癌特异靶向分子探针的制备方法，其特征在于：步骤S10和S11所述过滤均采用PD-10脱盐柱。

9.如权利要求2所述的乳腺癌特异靶向分子探针的制备方法，其特征在于：步骤S11中所述浓缩过滤的具体方法为纯化后的溶液通过30kDa的超滤离心管浓缩后溶液，再经过0.22μm的过滤器过滤得到最终的产物cRGD-MNPs。

10.如权利要求1所述的乳腺癌特异靶向分子探针可应用于乳腺癌保乳手术中的光声导航探针。