[发明专利]一种解脲脲原体蛋白MYPE7430蛋白及其应用

说明书

本发明公开了一种解脲脲原体蛋白MYPE7430蛋白及其应用，其氨基酸序列如序列1所示；本发明利用ELISA间接法测定标本中抗‑MYPE7430蛋白抗体水平(文中用抗‑M IgM和抗‑M IgG表示)。用纯化的人MYPE7430蛋白包被微孔板，制成固相抗原(Ag)，可与血清中待测抗体抗‑M IgM(或抗‑M IgG)特异性结合，形成抗原抗体复合物，经洗涤后加入酶标二抗(Ab*)，构成固相抗原‑标本抗体‑酶标二抗复合物，经洗涤后加入显色底物,酶催化显色底物显色，温浴后加入终止液终止显色，利用酶标仪检测450nm下OD值，利用阴阳性对照计算得出cut‑off值，将标本所得OD值与cut‑off值相比较，定性判断抗体含量。

技术领域

本发明属于免疫学检测技术领域，具体涉及一种解脲脲原体蛋白MYPE7430蛋白及其应用。

背景技术

解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,Uu)是能在体外培养的最小的原核细胞型微生物之一。Uu是人类泌尿生殖道一种常见的病原体,可引起尿道炎、前列腺炎、风湿性关节炎和盆腔炎等疾病。目前解脲脲原体病原学检查方法主要有分离培养及PCR检测。其中分离培养法有液体培养法和固体培养法，分离培养法检测Uu虽然方法简单且是检测解脲脲原体金标准，但费时且可因标本取材量不足，送检时间不及时，保存条件不当，取材前是否使用抗生素等因素影响而造成假阴性结果。PCR法检测灵敏度高，特异性强，但技术水平要求高，仪器水平要求高，不适宜基层使用且结果易出现假阳性，只可用于感染的辅助诊断及药物治疗的疗效监控，不能单独作为确诊或排除病例的依据。

目前根据有关解脲脲原体的免疫学检测方法较少，随着可通过检测具有特异性的解脲脲原体抗体从而诊断解脲脲原体感染。MYPE7430蛋白为解脲脲原体中的一种蛋白质，为一种新的磷酸吡哆醛依赖的半胱氨酸脱硫酶，分子量为46kDa。半胱氨酸脱硫酶(cysteinedesulfurase IscS)是一类依赖磷酸吡哆醛的酶，存在于多种生物中，为同质二聚体，能催化L-半胱氨酸脱硫生成L-丙氨酸和硫。在体内Fe-S转移的早期起关键作用，反应期间形成与酶结合的半胱氨酸过硫化物中间物并作为硫的载体和供体，随后参与含硫生物分子的生物合成。当机体发生解脲脲原体感染时，体内MYPE7430蛋白水平升高，刺激机体产生针对MYPE7430蛋白的抗体，可通过检测MYPE7430蛋白特异性抗体水平诊断解脲脲原体感染。

发明内容

本发明的目的是提供一种解脲脲原体蛋白MYPE7430蛋白及其应用，其是通过MYPE7430蛋白作为解脲脲原体感染标志物，从而实现对解脲脲原体感染的检测。

本发明这种解脲脲原体蛋白MYPE7430蛋白，其氨基酸序列如序列1所示，具体如下。

MLKNLRNEIEWFKNNPDYVYLDSGATSLKPKSVVDNMVYYCNNVCTNPHNDDSTFAHQAHIVMDDTKNKLSKVLGTKKENLVFTPNATYGLNSVAHFLKPFFNKGDEIVLTNAEHASNILPWYDIYEQYKAIHQEIKIQYVEVDYQSDNIENFLKKINKNTKLVCFANETNLIGNSIDAIKLASEIKKINPNIFICVDATQYMAHNRMNLENSNIDFVVGSAHKMLGPTGIGFLYISSDLIEKMKPNIVGGGMNFEIKRNYYSLLSGTAKFEAGTANIMAIYGWNKALDYYLDDDLENAKNKIFELKKYLDFELGKIEGIKVLNKGINAFNSIFIKENIFSQDFSSYLGNKKIIVRSGLSCAKLANEILNLDHVVRVSYHFYTNKSDIDKLIKAVKEFKKGDILNGLL

本发明这种解脲脲原体蛋白MYPE7430蛋白制备检测试剂盒的方法，包括以下步骤：

S1人工合成MYPE7430蛋白其氨基酸序列如序列1所示；