[发明专利]一种用于增强瘤内递送的抗肿瘤纳米药物的制备方法

权利要求书

1.一种用于增强瘤内递送的抗肿瘤纳米药物的制备方法，其特征在于：根据化学法制备ZnO纳米粒子，然后通过晶种生长法原位还原得到ZnO-Au纳米粒子，最后将ZnO-Au和CPPO负载在由脂质体膜和肿瘤细胞膜复合而成的纳米囊泡中得到ZnO-Au/CLM，通过降低肿瘤间质液压从而增强药物瘤内递送效果，同时联合饥饿治疗实现更高效地肿瘤杀伤。

2.根据权利要求1所述的一种用于增强瘤内递送的抗肿瘤纳米药物的制备方法，其特征在于：具体步骤包括：

S1、制备ZnO纳米粒子：将Zn(NO₃)₂溶于无水乙醇，得到Zn(NO₃)₂溶液，将Zn(NO₃)₂溶液放于磁力搅拌器，再匀速缓慢加入NaOH溶液中充分反应8～12 h，得到ZnO纳米粒子；

S2、制备ZnO-Au纳米粒子：将ZnO纳米粒子用柠檬酸三钠稀释，然后滴加HAuCl₄溶液，得到第一混合溶液，第一混合溶液在室温下搅拌约8～10 h，得到ZnO-Au纳米粒子；

S3、制备ZnO-Au/CL溶液：将胆固醇、大豆卵磷脂以及CPPO溶解于4～6 mL无水乙醇中，得到第二混合溶液，将第二混合溶液置于圆底烧瓶中，40～45 °C旋转蒸发10～20 min使其成膜，再向圆底烧瓶中加入ZnO-Au纳米粒子溶液、Tween-80和PBS溶液，40～45 °C旋转20～30 min，得到ZnO-Au/CL溶液；

S4、将肿瘤细胞分装到离心管中，离心5～10 min，收集沉淀，用1～2 mL超纯水重悬，再用200～400 W的细胞破碎仪超声破碎10～20 min，超声破碎后的悬液离心30～60 min获得肿瘤细胞膜碎片溶液；

S5、将ZnO-Au/CL溶液与肿瘤细胞膜碎片溶液混合，再通过规格为100～200 nm的脂质体挤出器挤出，获得包覆有肿瘤细胞膜的ZnO-Au/CLM纳米粒子。

3.根据权利要求2所述的一种用于增强瘤内递送的抗肿瘤纳米药物的制备方法，其特征在于：所述步骤S1中Zn(NO₃)₂的加入量为10～30 mg，无水乙醇的体积为5～15 mL。

4.根据权利要求2所述的一种用于增强瘤内递送的抗肿瘤纳米药物的制备方法，其特征在于：所述步骤S1中NaOH溶液的浓度为1.0～1.5 mg/mL，加入体积为5～10 mL。

5.根据权利要求2所述的一种用于增强瘤内递送的抗肿瘤纳米药物的制备方法，其特征在于：所述步骤S2中ZnO纳米粒子的加体积为1～2 mL，柠檬酸三钠的浓度为0.5～0.8mg/mL，体积为4～6 mL，HAuCl₄溶液的浓度为1～3 mmol/L，体积为2～4 mL。

6.根据权利要求2所述的一种用于增强瘤内递送的抗肿瘤纳米药物的制备方法，其特征在于：所述步骤S3中ZnO-Au/CL为脂质体包被的ZnO-Au/CPPO纳米粒子。

7.根据权利要求2所述的一种用于增强瘤内递送的抗肿瘤纳米药物的制备方法，其特征在于：所述步骤S3中胆固醇的加入量为5～7 mg，大豆卵磷脂的加入量为50～70 mg，CPPO的加入量为1～3 mg。

8.根据权利要求2所述的一种用于增强瘤内递送的抗肿瘤纳米药物的制备方法，其特征在于：所述步骤S3中ZnO-Au纳米粒子溶液的加入量为1～2 mL，Tween-80的加入量为10～20 μL，PBS溶液的加入量为8～10 mL。

9.根据权利要求2所述的一种用于增强瘤内递送的抗肿瘤纳米药物的制备方法，其特征在于：所述步骤S4中第一次离心的速率为1000～2000 rpm，第二次离心的速率为12000～13000 rpm。