[发明专利]表儿茶素的用途及细胞冷冻保存液和细胞冷冻保存方法

权利要求书

1.一种表儿茶素在提高神经干细胞冷冻保存后的复苏率中的用途；

神经干细胞在细胞冷冻保存液中保存；所述细胞冷冻保存液包括二甲基亚砜和表儿茶素；基于细胞冷冻保存液的二甲基亚砜浓度α与表儿茶素浓度β满足如下关系之一：

5.5≤α×β≤7.0 (1)

13.0≤α×β≤15.5 (2)

其中，二甲基亚砜浓度的单位为vol％；表儿茶素浓度的单位为μg/ml；

基于细胞冷冻保存液，所述表儿茶素在所述细胞冷冻保存液中的浓度为130～190μg/ml；

所述神经干细胞复苏率为75％以上。

2.一种细胞冷冻保存液，其特征在于，包括表儿茶素和二甲基亚砜；基于细胞冷冻保存液的二甲基亚砜浓度α与表儿茶素浓度β满足如下关系之一：

5.5≤α×β≤7.0 (1)

13.0≤α×β≤15.5 (2)

其中，二甲基亚砜浓度的单位为vol％；表儿茶素浓度的单位为μg/ml；

其中，所述细胞为神经干细胞；基于细胞冷冻保存液，所述表儿茶素在所述细胞冷冻保存液中的浓度为130～190μg/ml。

3.根据权利要求2所述的细胞冷冻保存液，其特征在于，基于细胞冷冻保存液的二甲基亚砜浓度α与表儿茶素浓度β满足如下关系之一：

5.7≤α×β≤6.5 (1)

13.6≤α×β≤15.2 (2)。

4.根据权利要求2所述的细胞冷冻保存液，其特征在于，二甲基亚砜浓度α为3～8vol％。

5.根据权利要求2所述的细胞冷冻保存液，其特征在于，所述细胞冷冻保存液的二甲基亚砜浓度α与表儿茶素浓度β选自如下组合之一：

(1)α＝5vol％，且β＝130μg/ml；

(2)α＝8vol％，且β＝170μg/ml；

(3)α＝3vol％，且β＝190μg/ml；或者

(4)α＝8vol％，且β＝190μg/ml。

6.根据权利要求2～5任一项所述的细胞冷冻保存液，其特征在于，还包括神经干细胞完全培养基；所述神经干细胞完全培养基包含70～90vol％的DMEM/F12培养基，0.5～2vol％的N2添加剂，0.5～1.5vol％的链霉素-青霉素混合溶液，10～50ng/ml的表皮细胞生长因子EGF和10～50ng/ml的碱性成纤维细胞生长因子bFGF。

7.一种采用权利要求2～6任一项所述的细胞冷冻保存液进行细胞冷冻保存方法，其特征在于，包括以下步骤：

将细胞以0.8～1.2×10⁶个细胞/ml的浓度置于装有细胞冷冻保存液的容器中，-70～-90℃静置过夜，然后在液氮中冷冻保存，所述细胞为神经干细胞。