[发明专利]含药肝孵育液药理法及麻杏石甘汤含药肝孵育液制备方法

说明书

本发明公开了一种含药肝孵育液药理法及麻杏石甘汤含药肝孵育液的制备方法，本发明将经口服给药的中药按临床方法加工，取水煎液采用外翻肠囊法获得含药肠吸收液，取该含药肠吸收液与肝细胞悬液短时间孵育后，制备成含药肝孵育液，用于离体的组织器官、细胞等药理学试验。本发明所制备的含药肝孵育液，较为真实地反映了中药复方进入体内化学成分的实际移行或转化状况，并具有条件严格可控、干扰少、有效成分含量高、组间标准偏差小等优点，用于体外药理学研究，而无血清本身内源性成分的干扰，故稳定性高、重现性好，更为适合中药复方的体外药理作用及其机制探讨。

技术领域

本发明涉及中药复方新的体外药理学研究方法，尤其是涉及一种含药肝孵育液药理法及麻杏石甘汤含药肝孵育液的制备方法。

背景技术

体外药理研究在药物的活性筛选，毒性评价，深入的细胞、分子药理等研究中起重要作用。西药多为单一化合物，故溶于适当溶媒后即可直接开展体外药理学实验研究。中药尤其是复方因其组成药味多、成分复杂，直接添加法因其粗提液的理化性质如杂质、酸碱度、渗透压、pH值等都可对离体实验带来干扰；血清药理法作为中药复方经典的体外药理研究方法，广泛运用于其作用机理、物质基础和配伍理论等方面的探讨，然而由于涉及血清这一复杂体系，致使其稳定性、重现性、假阳性等困扰均难以克服；含药肠吸收液药理法有操作简便、成分含量高、干扰少、重现性好等优点，可用于中药复方药效物质基础的研究和有效成分的辨识，但因其未模拟口服中药复方体内的肠吸收后通过门静脉经肝入血的全过程，故与中药成分体内的实际移行或转化状况不完全相符；脑脊液药理学是用含药脑脊液代替含药血清进行体外中药神经药理学研究，由于脑脊液量少、获取不易，仅限于体外神经药理研究。

发明内容

本发明的第一个目的在于提供一种含药肝孵育液药理法，该方法通过体外肠吸收法获取中药复方的含药肠吸收液，再经肝细胞短时间孵育而制备的，并用之于体外药理研究的新方法。

本发明的第二个目的在于通过正交试验设计提供一种麻杏石甘汤含药肝孵育液的制备方法。

本发明的第一个目的是这样实现的：

一种含药肝孵育液药理法，特征是：经口服给药的中药按临床方法加工，得到该中药的水煎液；将该水煎液采用外翻肠囊法37℃温育，获得含药肠吸收液；取该含药肠吸收液与肝细胞悬液孵育30分钟以内，制备成含药肝孵育液，用于离体的组织器官、细胞等药理学试验。

本发明的第二个目的是这样实现的：

一种麻杏石甘汤含药肝孵育液的制备方法，特征是：具体步骤如下：

A、按临床煎煮方法，先将麻黄、石膏加入方药总量的8倍水，浸泡30分钟，加热至沸腾，改用小火煎煮30min，依次加入甘草和苦杏仁，煎煮40min，趁热过滤得到麻杏石甘汤，将麻杏石甘汤浓缩后定容于1g生药/mL的药液，取该药液采用外翻肠囊法温育2小时，取肠囊液得到含药肠吸收液；

B、取肝细胞悬液1×10⁴个/mL-1×10⁶个/mL与含药肠吸收液按体积比1:8-1:12混合均匀，37℃孵育10-30分钟，离心取上清液，即得麻杏石甘汤含药肝孵育液。

本发明将经口服给药的中药按临床方法加工，取水煎液采用外翻肠囊法获得含药肠吸收液，取该含药肠吸收液与肝细胞悬液短时间孵育后，制备成含药肝孵育液，用于离体的组织器官、细胞等药理学试验。本发明所制备的含药肝孵育液，较为真实地反映了中药复方进入体内化学成分的实际移行或转化状况，并具有条件严格可控、干扰少、有效成分含量高、组间标准偏差小等优点；用于体外药理学研究而无血清本身内源性成分的干扰，故稳定性高、重现性好，更为适合中药复方的体外药理作用及其机制探讨。

附图说明

图1为麻黄碱和伪麻黄碱的HPLC色谱图，(A)混合对照品；(B)阴性对照；(C)供试品；